MCE 国际站：Fluo-4 AM

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-101896

CAS：273221-67-3

纯度：≥99.0%

存储条件：-20°C, sealed storage, away from moisture and light *该产品在溶液状态不稳定，建议您现用现配，即刻使用。

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：Fluo-4 AM 是一种常用的检测细胞内 Ca2+ 浓度的探针。

生物活性：Fluo-4 AM 是一种细胞渗透性 Ca²⁺ 指示剂^[1]。 体外Fluo-4 AM 是一种荧光染料（λ_ex=494 nm，λ_em=516纳米）。预装 Fuo-4 AM，可以观察到非常明亮的荧光图像。在使用 fluo-3 AM 加载细胞进行的平行实验中，得到的荧光图像虽然在这种情况下清晰可辨，但不太亮^[1]。指南（以下是我们推荐的方案。该方案仅提供指南，应根据您的具体需要进行修改）。 1. 计数细胞并从每个样本（对照和实验）中取106个细胞。 2. 收集细胞（5分钟，3000×g，4℃），用PBS洗涤一次。 3. 用0.5-ml PBS重悬细胞，加入0.5 μl Fluo-4- AM（1 mM 库存）至最终浓度为 1 μM。 37℃孵育1小时。 4. 用PBS洗涤细胞3次（2分钟，3000×g），最后用1-ml PBS重悬。分成2个流式细胞仪管，每管0.5ml。 5.用流式细胞术评估染色，并用CellQuest软件等软件分析数据。

体外：Fluo-4 AM 是一种荧光染料 (λex=494 nm，λem=516 nm)。预装 Fuo-4 AM，可以观察到非常明亮的荧光图像。在使用 fluo-3 AM 加载细胞进行的平行实验中，得到的荧光图像虽然在这种情况下清晰可辨，但不太亮[1]。指南 (以下是我们推荐的方案。本方案仅提供指南，应根据您的具体需要进行修改)。 1. 计数细胞，从每个样本 (对照和实验) 中取106个细胞。 2. 收集细胞 (5分钟，3000×g，4℃)，用PBS洗涤一次。 3. 用 0.5-ml PBS重悬细胞，加入 0.5 ul Fluo-4- AM (1 mM 库存) 至最终浓度为 1 μM。37℃ 孵育 1 小时。 4. 用 PBS 洗涤细胞 3 次 (2分钟，3000×g)，最后用 1 ml PBS重悬。分成 2 个流式细胞仪管，每管 0.5 ml。 5. 用流式细胞术评估染色，并用 CellQuest 软件等软件分析数据。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

细胞实验：为了测量悬浮细胞的荧光，需要将大鼠嗜碱性白血病 (RBL) 细胞培养物稀释至 2 至 3×106 个细胞。将细胞悬浮在 1 μM 染料（包括 Fluo-4 AM）中，在 37°C 下孵育 30 分钟。然后将细胞悬浮液转移到比色皿中，用荧光分光光度计测量荧光发射强度[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

Emission (Em)：526

Excitation (Ex)：485

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参考文献：[1]. Gee KR, et al. Chemical and physiological characterization of fluo-4 Ca(2+)-indicator dyes. Cell Calcium. 2000 Feb;27(2):97-106. [2]. Fluo-4.

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