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狂犬病实验室诊断的最新进展(6)
Recent updates on laboratory diagnosis of rabies
印度的M. A. Ashwini等在今年一月出版的专业杂志《Indian J Med Res (印度医学研究杂志)》上发表了一篇综述论文,题目是《Recent updates on laboratory diagnosis of rabie(狂犬病实验室诊断的最新进展)》(见本文末尾的参考文献)。要实现在2030年前在全球消除狗介导的人类狂犬病的宏伟目标,狂犬病的实验室诊断是首当其冲必须优先解决的一个重要问题。印度学者们的这篇综述论文对我们也很有参考价值。
现将此论文的主要内容分若干次译介如下:
狂犬病的实验室诊断试验(Laboratory diagnostic tests for rabies)(2)
④ 病毒分离(Virus isolation):
可通过狂犬病组织培养感染试验(RTCIT)或小鼠接种试验(MIT)分离活病毒[1,12]。RTCIT可用于多种类型的样本,包括脑组织、唾液和脑脊液。它涉及使用特定的细胞系,如小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)、人类胚胎肾细胞系(HEK-293)、鸡胚胎相关细胞或幼鼠肾细胞(BHK-21)。这些细胞系为病毒的生长和复制提供了合适的环境,使其能够被检测和分离[12,63,65,66]。在小鼠接种试验(MIT)中,病毒是通过将临床样本脑内接种至3-4周龄的小鼠而分离到;可通过观察临床症状和对感染组织进行实验室检测来检测病毒的存在[64-66]。
然而,RTCIT(狂犬病组织培养感染试验)和MIT(小鼠接种试验)都有局限性,作为常规诊断技术可能不实用。在配备细胞培养设备的实验室中,MIT应该尽可能被RTCIT取代。细胞培养技术有几个优点,包括避免活体动物使用,成本效益和能更快获得结果。
⑤用于狂犬病诊断的其他试验方法(Other diagnostic tests for rabies):
其他可能的狂犬病诊断方法包括用于检测狂犬病毒抗原和抗体的流式细胞计数( flow cytometry )[89],用于检测狂犬病毒多肽和类型的基于质谱的蛋白质组学技术[90],都可提高诊断的敏感性。如果在阴性结果的情况下临床怀疑度很高,则可重复测试生物传感器的使用情况[82]。然而,为了使这些测试成为标准护理措施的组成部分,还需要进行更彻底和广泛的验证。
对诊断检测结果的解释(Interpretation of diagnostic test results):
有几个因素,包括疾病的持续时间、疾病的临床表现、临床样本(如唾液)中病毒的间歇性排出、以前的狂犬病疫苗接种和患者的免疫状况,都可能影响狂犬病诊断测试的结果。死前检测,如病毒分离、病毒抗原检测和病毒RNA检测,更有可能在疾病早期产生中和抗体并导致组织“自身消毒(autosterilizatio)”之前产生阳性结果。
血清学诊断包括检测脑脊液和/或血清中的病毒抗体,由于大多数受影响个体的狂犬病临床病程迅速而短暂,因此其效用有限。可检测到的抗体水平的产生可能发生在疾病进展的较晚阶段,这使得血清学检测对早期诊断的可靠性降低。然而,对于存活超过1-2周的个体,血清学检测在确认诊断方面可能是有价值的[7,8,12]。
据报道,在临床样本中,中和抗体的存在与病毒RNA的检测呈负相关[7,8,12,13,25,54]。此外,个体的疫苗接种状况也会影响用于病毒RNA检测的PCR检测结果。那些在发病前至少接受过部分狂犬病疫苗接种的人,与未接种疫苗的人相比,PCR检测结果呈阳性的可能性更小[7]。
图1和图2提供了一种诊断算法,其中包括对狂犬病进行死前和死后实验室确认的推荐检测[12]。
(未完待续)
参考文献:
M. A. Ashwini, et al., Recent updates on laboratory diagnosis of rabies, Indian J Med Res 159, January 2024, pp **-** , DOI: 10.4103/ijmr.ijmr_13
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