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狂犬病免疫力检测(14)

已有 2092 次阅读 2026-7-21 23:12 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

狂犬病免疫力检测(14)

前记:

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第4版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第13章是《Measures of rabies immunity(狂犬病免疫力检测）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第13章狂犬病免疫力检测(14)

（Measures of rabies immunity）

4 结果的质量保证(1)

(Assuring quality results)

结果的质量取决于检测的性能特征（“适用性”）、技术人员的专业能力、实验室设施、设备及耗材，尤其取决于样本本身。性能特征通过方法学验证予以界定，后者包含一套完整的实验方案，用于评估某一特定用途下方法的准确度、精密度、专属性、灵敏度、线性范围和稳健性（ICH, FDA, WHO, OIE）。技术人员的专业能力依托培训与经验积累，并需通过能力验证予以证明，以证实其能够按既定标准完成检测。实验室设施（包括空间、环境、水质等）必须满足最低要求，以确保检测在受控的质量状态下开展。建立标准的审计以及对维持标准能力的持续监测，对于保障检测结果的可信度至关重要。

关键试剂、耗材和设备必须质量稳定，这只能通过严格使用经方法学验证确认的获批试剂、耗材及设备来实现。正如为特定用途选择不适用的检测方法会带来的后果一样，若在结果解读时未充分考虑检测、实验室或样本的适用性与局限性，也可能导致人员培训不足或专业能力欠缺、设施设备维护不当、样本质量低劣以及得出错误结论等问题。样本质量及其类型对于检测方法的选择和结果的解读均至关重要。实验室需采取措施，确保解决上述问题，并通过建立质量管理体系，将所有风险降至最低。

判断某一方法的性能特征是否“符合预期用途”的唯一途径，是通过验证对检测方法进行明确界定。一个在血清基质中测量效价范围为0.1～10.0 IU/mL抗体时具有可接受准确度和精密度的方法，若未经验证实验评估其在高滴度样本、不同基质或其他体液样本中的适用性，则无法声称其具有相同的准确度和精密度水平。定性检测的关键方法参数包括灵敏度、特异性和预测值。除灵敏度和特异性外，定量检测还需明确准确度（接近真值的程度）、精密度（测量结果的可重复性）、线性和可报告范围。验证工作通常针对特定目的开展，例如评估用于狂犬病暴露后治疗的人源单克隆抗体组合物的临床试验样本，以及疫苗效价评价（Kostense et al., 2012; Kramer, Bruckner, Daas, & Milne, 2010）。稳健性评价旨在描述方法在实验室条件正常波动（包括设备性能的正常波动、试剂批间差异或不同操作人员之间的差异）下仍能符合既定标准的能力。生物变异（样本本身的生物变异及检测中生物组分的变异）必须与分析变异分开考量。例如，同一样本的两份检测结果可能仅因细胞对病毒感染的易感性不同而产生差异；上周使用的细胞与后续检测所用的细胞，其病毒易感性特征可能存在差别。MNA细胞对RABV感染的易感性可随细胞传代次数而变化（Pouliott et al., 2017）。这种易感性差异是影响血清中和试验测定RABV抗体的因素之一，凸显了对相关因素进行控制与管理的必要性。此类因素引起的变异与其他来源的变异相互独立。对于同一样本的重复测定，可借助统计工具设定预期方差，并判断何种方差属于显著性差异的证据，例如最小显著性比值（MSR）（Khan & Findlay, 2009）。RABV抗体的测定或检测可能受到干扰因素的影响。干扰可由交叉反应抗体、非特异性结合及基质效应（溶血、脂血或“污浊”样本等）引起。干扰不仅可能发生于样本中的目标抗体，也可能出现在检测抗体或竞争抗体之间的相互作用过程中。样本中天然存在的蛋白质（如白蛋白、纤维蛋白原和补体因子）亦可导致检测干扰（Selby, 1999）。若未考虑干扰因素的影响，含干扰因素样本的检测结果可能产生误导。在大多数情况下，干扰程度较低，在高稀释度样本或高效价样本中通常不会造成测量问题，因为特异性结合的强度高于较弱的干扰反应。当怀疑存在干扰或需排除干扰时，可采用替代方法对样本进行评估，以最大程度降低干扰因素的影响，从而实现特异性活性的检测与定量。