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狂犬病免疫力检测(15)

已有 2255 次阅读 2026-7-22 21:35 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

狂犬病免疫力检测(15)

前记:

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第4版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第13章是《Measures of rabies immunity(狂犬病免疫力检测）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第13章狂犬病免疫力检测(15)

（Measures of rabies immunity）

4 结果的质量保证(2)

(Assuring quality results)

检测下限（lower limit of detection，LOD）受干扰因素和检测参数的影响。如果检测目的是确定 RABV 抗体的存在或不存在，那么定义检测方法能够可靠检测到的最低抗体水平至关重要。但是，如果准确且精确地测量低水平 RABV 抗体的能力很重要（例如在暴露后治疗中被动 RABV 免疫球蛋白水平的评估），则需要定义检测方法定量下限（lower limit of quantitation，LLOQ）。

分配给检测方法的截断值（Cut-off values）既取决于 LOD 或 LLOQ，也取决于检测目的（例如，抗体检测或与保护相关的水平测量）。如果狂犬病血清学检测的应用是识别低水平的 RABV 抗体并排除假阴性检测结果，则截断水平应较低，但这可能会产生一些假阳性检测结果。相反，较高的截断值（即高于可能允许一些假阳性检测结果的水平）将仅识别真正的阳性检测结果，如果该方法的目的是可靠地仅识别那些个体，这是可以接受的。

权衡之处在于，高截断水平会增加假阴性的数量（即排除一些低水平的真阳性）。假阳性和假阴性的概率与检测方法的精密度有关。变异性较高的检测方法，特别是在截断水平附近，会排除一些效价接近截断水平的真阳性样本，反之也会将一些真阴性识别为阳性。在重复检测时，这些样本可能产生阳性或阴性检测结果。

样本基质会影响特定方法的 LOD 和 LLOQ。因此，每当样本基质发生改变时，都需要重新评估此参数。任何影响检测方法灵敏度的变化也会改变 LOD（见表 13.3）。实际上，程序或样本的任何变化都可能需要重新验证，以确定对已建立的性能特征的影响。

表13.4中列出的方法变异性（适用于结合检测或中和检测）可用于针对特定目的定制方法，例如测量特定物种的抗体或在一定效价范围内的抗体，但为定制检测方法而实施的变化也可能导致方法性能特征的变化。

表13.3 一组血清样本，包括国际狂犬病参考血清（SRIG）的稀释液、内部 RVNA 阳性标准品和 RVNA 阴性血清，在同一实验室进行了三次独立运行检测，每次重复两次，每次使用不同的攻击病毒剂量（TCID50）。

(A panel of serum samples consisting of dilution of an international rabies reference serum (SRIG), internal RVNA positive standards, and an RVNA negative serum were tested in the same laboratory in three independent runs in duplicate, each with varying challenge virus doses (TCID50).)

显示了平均 IU/mL 和倒数滴度（reciprocal titer）值。NN 表示未观察到病毒中和，未计算数值。当使用高病毒剂量时，观察到 0.1 IU/mL 水平的灵敏度损失。IU/mL 值在不同病毒剂量（TCID50）之间具有可比性，而滴度值则不可比。平均值和 CV 值以粗体显示，以与实验室值区分。

表 13.4 可应用于中和检测或抗原结合检测的"适合目的"方法的变异性。

（“Fit for Purpose”method variations that can be applied to neutralization or antigen binding assays. ）

免疫力可通过不同方法进行测量。比较不同方法的结果是很自然的，考虑如何进行比较也很重要。虽然通过相关系数评估方法间的一致性非常常见，但基于该值得出的结论是不恰当的。进行方法比较的最佳方式是计算"方法间差异的平均值和标准差"（Altman, 1991）。仅仅生成和检查数据是不够的；应用适当的统计工具至关重要。对这些实践而言，对统计学的功能性理解或与统计学家合作通常是必不可少的。将统计学应用于免疫检测性能评估是一个专业能力领域，当检测方法将用于确定生物制品的验收时，这一点尤为重要（Findlay et al., 2000）。

（未完待续）