狂犬病免疫力检测(3)

前记: 

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第４版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第13章是《Measures of rabies immunity(狂犬病免疫力检测）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第13章 狂犬病免疫力检测(3)

（Measures of rabies immunity）

1 引言 (3)

（Introduction）

研究性血清学侧重于检测和量化血液中的免疫组分（通常为血清），包括针对不同表位的多种亚类免疫球蛋白。狂犬病特异性IgM和IgG抗体的出现与否，取决于暴露于抗原后体液免疫应答的时间进程。因此，采血时机将直接影响特定类别抗体的检出能力。在初次抗体应答阶段，IgM最先产生，水平相对较低；随后发生类别转换，产生更高水平的IgG。若检测旨在捕捉初始免疫应答，则应设计用于同时检测IgM和IgG。所产生的免疫球蛋白特异性，既受诱导抗体产生的狂犬病毒蛋白上特定表位的驱动，也受宿主免疫基因（如MHC基因）的影响。因此，试验中使用的病毒表位对检测特异性起着关键作用。无论是通过灭活病毒疫苗接种还是自然暴露接触RABV，均可诱导机体产生针对所有病毒蛋白的抗体，但主要针对RABV糖蛋白（G）和核蛋白（N）。针对能够中和RABV的单克隆抗体（MAbs）的研究表明，这些MAbs靶向G蛋白上的多个表位（Buthelezi et al., 2016; Tordo, 1996）。RABV中和需要在每个G刺突上结合足够数量的抗体分子，以诱导病毒-受体结合活性的空间位阻（steric hindrance）（Flamand, Raux, Gaudin, & Ruigrok, 1993）。另一种机制可能涉及G蛋白的构象改变，最终导致病毒粒子丧失受体结合能力（Irie & Kawai, 2002）。RABV疫苗接种引发的体液免疫应答包含混合的多克隆抗体，它们通过多种复杂的中和机制发挥作用。

检测针对狂犬病病毒抗原的特异性抗体，可通过沉淀反应、凝集试验、免疫电泳、放射免疫分析、酶联免疫吸附试验（ELISA）、蛋白质印迹法、间接免疫荧光、免疫电镜、免疫层析以及血清中和试验等方法实现。所有这些检测均依赖于抗体-抗原相互作用来探测抗体的存在。常用两大类基本检测方法：（1）涉及抗体与抗原初级结合活性的检测；（2）用于测量抗体中和功能的效应试验。尽管免疫系统其他组分和产物也参与其中，但感染后对临床狂犬病的防护在很大程度上依赖于狂犬病毒中和抗体（RVNA）的存在。因此，为量化狂犬病疫苗接种后的免疫水平，推荐使用能够检测并定量具有功能性中和RABV能力的抗体的方法。解读任何实验室检测结果时，都必须结合检测目的（如监测、诊断、生产制造、免疫保护等）进行综合考量。结果的有效性核心在于其是否符合预期用途。

（未完待续） 

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