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人用及兽用狂犬病疫苗(7)

已有 113 次阅读 2026-3-25 03:04 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

人用及兽用狂犬病疫苗(7)

前记:

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第４版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第14章是《Human and animal vaccines(人用及兽用疫苗）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第14章 人用及兽用疫苗(7)

Human and animal vaccines

11. 生产系统(Production systems)

对价格可承受疫苗的需求在很大程度上决定了生产系统的选择，该系统应适合大规模生产，并能轻松提高工艺参数。可重复使用或一次性使用的转瓶(roller bottles，RBs)常用于贴壁细胞的培养。然而，处理大量转瓶劳动强度大，且污染风险相对较高。此外，使用传统的转瓶进行疫苗生产会导致疫苗产量低下(Yu, Huang, Zhang, Tang, & Liang, 2012)。尽管如此，疫苗行业在病毒疫苗生产中利用了转瓶大规模生产的积极特点。

与转瓶相比，多层培养系统(Multilayer cultivation systems)拥有更大的表面积，便于进行大规模生产。堆叠式设备(Stacked devices)，例如CellCube (Corning)、CellSTACK (Corning)和CellFactory (Thermo Scientific)，减少了对培养箱空间和人工操作的需求，并提供更好的工艺控制。然而，在扩大规模时需要自动化。较低的操作者技能要求和较低的投资成本，使其成为设施复杂性有限的制造商负担得起的选择。改良的固相装置，以微载体(例如Cytodex 3)和巨载体(例如Fibra-Cel disks)的形式，已被开发出来以克服与静态和转瓶培养系统相关的局限性。

已开发了使用基于灌流式搅拌罐生物反应器( perfusion-based stirred tank bioreactor)的微载体培养(Kallel et al., 2006)和使用填充床生物反应器( packed-bed bioreactor)的巨载体培养(Hassanzadeh, Zavareh, Shokrgozar, Ramezani, & Fayaz, 2011)。两者均已用于RABV抗原的生产。微载体提供了较高的表面积与体积比，并能有效监测和控制关键工艺参数。它们实现了高细胞密度并允许放大规模(Birch, 1999)。使用微载体的细胞培养可在过程中轻松地将培养基与细胞分离，从而提高病毒产量(Gallo-Ramirez, Nikolay, Genzel, & Reichl, 2015)。基于微载体的工艺的一个普遍缺点是需要接种高数量的细胞，以及微载体的昂贵和一次性特性。此外，使用无血清培养基常常导致细胞贴壁不良(Frazzati-Gallina, Paoli, Moura˜o-Fuches, Jorge, & Pereira, 2001)，需要外源补充重组黏附因子。

大多数用于疫苗生产的培养系统提供的接种和收获选项有限。它们对pH值和氧气的监测有限，对培养参数(如温度，有时是补料速率)的控制也有限。然而，由于此类系统的简单性和稳健性，一些疫苗生产商仍然依赖这些培养系统。此类系统也已被应用于为微载体系统的大规模生产制备细胞种子，或为感染生物反应器制备病毒种子(Jackson, 2013)。这里描述的所有生产系统都因其成本高而不太适用于动物狂犬病疫苗的生产。因此，理想的情况是获得适合悬浮培养生长的细胞，以便可以使用搅拌罐生物反应器轻松地进行大规模扩增并降低成本(Atanasiu, Ribeiro, & Tsiang, 1972; Chapman, Ramshaw, & Crick, 1973)。一种BHK CZ细胞系，是BHK-21细胞系的衍生物，具有适合工业应用的理想特性，包括能够在悬浮液中生长并能在大约14小时内完全沉降(这是在悬浮培养中感染细胞的前提)，以及它们能在低血清水平的培养基中生长。在搅拌罐生物反应器中培养的BHK细胞生产的家畜用灭活狂犬病疫苗已在全球销售。