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2022年最新版《狂犬病》专著选介（10）

已有 2654 次阅读 2022-12-6 16:47 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

2022年最新版《狂犬病》专著选介（10）

总目录

前言

历史背景

流行病学分析方法

　　死亡率数据来源

　　发病率数据来源

　　血清学调查

　　实验室方法

影响流行病学模式的病原体的生物学特征

描述性流行病学

　　发病率

　　流行的行为

　　地理分布

　　时间分布

　　年龄、性别、种族和职业：社会经济、营养和遗传因素

传播的机制和途径

发病机制和免疫

宿主反应模式

　　临床特征

　　诊断

预防和控制

　　基本的流行病学方法

　　免疫的基本概念和实践

进化问题

　　流浪犬的管理:口服狂犬病疫苗(ORV)是一种解决方案?

　　目前预防狂犬病的生物制剂有哪些替代品?

　　临床人类狂犬病的治疗?

　　疾病引入/再引入的威胁?

　　动物种群管理?

参考文献

流行病学分析方法　　

实验室方法（１）　　

能引起脑炎的若干种病因可能与狂犬病相混淆。流行病学研究应以狂犬病疑似疾病或死亡的实验室确诊为基础。如前面的历史描述所述，实验室技术在上个世纪逐渐得到发展。尽管许多实验室采用了不同的方法，但仍推荐并广泛使用 WHO 狂犬病专家磋商会(2019年)的标准技术和《WHO狂犬病实验室技术（ WHO Laboratory Techniques in Rabies）》的现行版本。这些文本包括标本的收集、制备和运输方法；组织和器官切除；实验动物接种；病毒抗原的检测程序；血清学鉴定；病毒的细胞培养和繁殖；电子显微镜；疫苗生产；效力和安全性的确定；通过抗原和遗传技术进行特异性病毒鉴定。对于管控国际或国内运输如狂犬病毒这样特定的具有潜在传染性的标本的条例，应咨询当地或国家公共卫生实验室以获得最新的变更情况。

历史上，对狂犬病患者的脑组织进行内基氏（Negri）小体检查，Negri氏小体是能在光学显微镜下观察到的特定的胞浆内包涵体(图5)。这些包涵体含有病毒核蛋白，其积累的数量大到可以用塞勒斯（Seller’s）、姬姆萨（Giemsa）、曼恩（Mann）或其他方法染色后检测到，并可以在显微镜下观察到。在海马体中，阿蒙角（Ammon’s horn）是中枢神经系统的一个特殊部分，通常用于检查内基氏小体，小脑的浦肯野（Purkinje）细胞和大脑皮层的锥体细胞也可如法炮制。这项技术的局限性包括，在多达四分之一到三分之一的狂犬病病例中可能没有内基氏小体，而其他因素产生的假象和夹杂物只有在拥有大量的实验室经验后才能避免混淆和明确区分。

图5.　狂犬病毒感染脑组织的显微照片(×500)，显示多个细胞质内品红色包含体，称为内基氏小体。(由美国公共卫生图像图书馆提供)　　　

通常，将可疑诊断材料接种动物曾被广泛用于支持狂犬病诊断，特别是因为在人类狂犬病病毒暴露情况下假阴性结果的潜在戏剧性后果。实验室啮齿类动物通常用于病毒分离，因为乳鼠和刚断奶小鼠对脑内接种感染高度敏感。一般情况下，从接种到发病的时间从7天到4周不等，但可能早在接种后4天就可确认大脑中的病毒抗原。在接种的动物中，作为疾病和死亡来源的狂犬病的确认应始终进行，因为实验室动物可能死于某些共患病或原临床标本中其他病原体的感染。除了使用小鼠外，小鼠成神经细胞瘤细胞（neuroblastoma cell）培养在从狂犬病动物的唾液和大脑中分离现场毒株方面与实验室动物一样敏感，并且是有细胞培养设施的实验室的首选方法。荧光抗体(FA)试验可证实感染细胞中抗原的存在。

简而言之，直接FA试验使用与狂犬病免疫血清结合的荧光素染料，然后与推定的狂犬病受试者的中枢神经组织(包括脑干和小脑或海马)的丙酮固定的涂片反应。在适当波长的光线下通过显微镜观察荧光来检测抗原-抗体反应。有经验的实验室人员使用直接FA测试是非常快速和可靠的。直接FA法是新鲜或冷冻组织的首选检测方法，因为其检测具有敏感性、特异性和经济性。免疫组化检测，或改良的FA技术，可应用于福尔马林固定的组织；然而，这种方法比较繁琐，并且不能区分不同的丽沙病毒种类。此外，逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法可用于诊断支持。疑似狂犬病动物的脑组织仍不时被放入福尔马林中提交，可通过免疫组织化学或分子方法予以确认。

(未完待续）

参考文献：

Abrahamian, F.M., Rupprecht, C.E. (2022). Rhabdovirus: Rabies. In: Kaslow, R.A., Stanberry, L.R., LeDuc, J.W. (eds) Viral Infections of Humans. Springer, New York, NY. https://doi.org/10.1007/978-1-4939-9544-8_28-1

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