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【工具篇】怎样使用Scaffold查看蛋白质二级谱图

已有 5014 次阅读 2019-3-31 21:47 |个人分类:蛋白质组学|系统分类:科研笔记

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下载Scaffold free viewer


Scaffold是一款可视化质谱数据分析软件,一个ID号只能绑定一台电脑的商业化收费软件,但是可以下载其免费版ScaffoldViewer进行数据解析,此文主要介绍查询二级肽段谱图功能,此软件Scaffold Viewer只能打开商业版scaffold生成的任意*.SF3文件,然后就可以对数据进行分析和查阅。

使用者可享受同商业化付费版相近的功能:比较样本,蛋白,肽段和谱图等功能,可对蛋白可信度,肽段可信度和匹配肽段或者FDR数值。


下载界面

下载网址:http://www.proteomesoftware.com/products/free-viewer/

Scaffold提供的较为全面的数据展示,并且提供详细的数据分析工具,其中查看二级谱图在蛋白窗口查看,当然还有其他窗口,数据上传窗口、样本窗口、蛋白窗口、相似度窗口、定量窗口等。


蛋白窗口(Protein Viewer)


此文主要是介绍怎样查看发表文献所需的质谱高清谱图,所以只介绍蛋白窗口相关功能,选择蛋白窗口之后,在看下图中相应3个参数的选择:分别是ProteinThreshold、Peptide Threshold和肽段最小数量。


蛋白阈值(Protein Threshold)

点击左侧选项按钮,使用者可以设置由软件提供的蛋白可信度的数值,当然还可以根据不同的FDR值进行选择。

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蛋白阈值设置


独有肽段最少数目(Minimum Number of Peptides)

使用者可以设置Unique Peptide的数目对蛋白进行筛选数据,可以筛选找出可信度较高的蛋白。

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独有肽段最少数目

肽段阈值(Peptide Threshold)

通过此选项进行选择,使用者可以根据所鉴定到肽段的可信度对数据进行筛选,同样也可根据相应的FDR数值进行筛选,相应的放宽或者收紧可信度区间。

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肽段阈值


当根据自己需求对数据进行筛选之后,使用者可以在蛋白窗口中查找对应的信息,例如在蛋白序列选项卡中,可以看到质谱所检测的肽段序列覆盖率,以及相应的修饰位点,如下图所示。

4.png

Protein Sequence Pane


在谱图选项中,呈现出对应的鉴定肽段的质谱峰图,可以根据实验需求进行调整,并可导出相应的图片。

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Spectrum tab

此图表是可以互动的,单击鼠标左键,可以看到所在位置的质荷比(m/z),持续点击左键拖拽,可以放大对应的区间峰图,然后再单击左键,恢复全部峰图,单击鼠标右键则有其他菜单功能,例如导出图片任意格式,打印图片等等功能。


此文主要简单介绍Scaffold中查看二级高清谱图功能,此软件也具有其他相关的分析功能,但是Scaffold Viewer 只能免费查看分析后的数据,任何需要.sf3文件的朋友均可找我们获取,以便更直观的查看和分析质谱数据。


原文链接


AIMS---蛋白质谱服务商,提供快速便捷的 LC-MS/MS 蛋白定性/定量检测。



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