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狂犬病毒：结构、组成、感染循环和生命周期(14)

已有 139 次阅读 2026-2-13 17:50 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

狂犬病毒：结构、组成、感染循环和生命周期(14)

(Rabies virus: Structure, composition, infection cycle and life cycle)

前记:

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第４版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第2章是《Rabies virus(狂犬病毒）》。

现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第2章　狂犬病毒(14)

Rabies virus

3 基因组与RNP结构（续）

3.4 狂犬病毒N-vRNA基因组的复制

(Replication of RABV N-vRNA genomes)

基因组N-vRNA复合体的复制涉及合成互补的全长反基因组N-cRNA。因此，病毒聚合酶在此充当一种RNP依赖性的RNP聚合酶,即复制酶(replicase）。与N-vRNA一样，新生的N-cRNA也会在延伸的同时被衣壳化。cRNA延伸与N蛋白衣壳化的偶联也决定了全长N-cRNA的复制得到保障。此外，复制酶必须忽略转录信号序列。与由L-P异源多聚体组成的转录酶不同，复制酶被认为是由L蛋白与P-N异源多聚体结合组成，其中P蛋白作为N蛋白的伴侣，负责新生cRNA的特异性衣壳化（Chenik et al., 1994; Fu et al., 1994; Schoehn et al., 2001）。

N-cRNA的合成起始于N-vRNA基因组的3'端，通过不依赖引物的合成，产生反基因组的5'端（即产生一段对应于短前导RNA的序列）（图2.3）。在弹状病毒感染的细胞中发现存在N-衣壳化的前导RNA（Blumberg, Giorgi, & Kolakofsky, 1983），这表明新生反基因组序列的衣壳化是由复制酶启动的，或者前导RNA序列包含一个特定的N蛋白包装信号，能进一步引导聚合酶进入复制酶模式。X射线分析表明，每个狂犬病毒N蛋白单体覆盖9-10个核苷酸的RNA。其他单股负链病毒的研究揭示了平末端N蛋白相位的重要性，这表明首个N蛋白单体应以覆盖前9-10个核苷酸的方式形成。在存在高水平N-P（或L-P-N）异源多聚体的情况下，衣壳化cRNA（或vRNA）的合成以持续进行的方式发生，直至达到模板的5'端。产生的反基因组N-cRNA的3'端在前11个核苷酸上与基因组vRNA的序列相同，并且在N蛋白可用的情况下，能有效指导大量基因组N-vRNA的合成（图2.3）。

值得注意的是，弹状病毒的反基因组启动子在指导复制方面远比基因组启动子活跃。因此，在感染细胞中产生的大量全长N-RNA是负链vRNA，它们可用于后代的进一步转录、复制和组装（Finke & Conzelmann, 1997）。具体而言，在狂犬病毒和水泡性口炎病毒感染的细胞中，vRNA分别占全长RNA的98%和90%（Finke & Conzelmann, 1997, 1999; Whelan et al., 2004）。相比之下，在基因组和反基因组RNA都拥有源自反基因组启动子的相同启动子的重组狂犬病毒中，会产生等量的基因组和反基因组N-RNA。因此，病毒的反基因组启动子似乎在竞争复制酶活性方面有效地胜过了基因组启动子。这一点在缺陷干扰颗粒上得到了最有力的证明（Clark et al., 1981; Wiktor et al., 1977; Wunner & Clark, 1980）。最有效干扰水泡性口炎病毒复制和传播的水泡性口炎病毒DI颗粒的基因组属于所谓的5'末端回折拷贝型（Marriott & Dimmock, 2010）（见图2.3）。这些是在从病毒反基因组启动子起始RNA合成过程中，通过聚合酶从模板N-cRNA上解离并反向拷贝新生的N-cRNA而产生的，其正链和负链RNA具有相同的3'末端反基因组启动子。除了直接干扰辅助病毒的复制外，单股负链病毒的缺陷干扰RNA也很容易被模式识别受体识别并刺激抗病毒免疫反应（Pfaller, Donohue, Nersisyan, Brodsky, & Cattaneo, 2018; Sanchez-Aparicio et al., 2017）。