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仙台病毒的生物学特点
仙台病毒(1953年在日本仙台发现,命名为Fushimi株。仙台病毒(Sendai virus)属于副黏病毒科、呼吸道病毒属病毒,是具有包膜的病毒,病毒核酸为单股负链RNA,基因组长度15 384个核苷酸,基因组编码6个结构蛋白:核壳蛋白(N),磷蛋白(P),基质蛋白(M),融合蛋白(F),血凝素·神经氨酸酶(HN)和大蛋白(Large protein,L),和一个非结构蛋白C,其中L蛋白具有高度保守性。
仙台病毒可引起啮齿类动物呼吸系统疾病,仙台病毒传染性强,在多数情况下呈隐性感染,改变体内细胞免疫反应,药效学实验结果,干扰实验结果,且被仙台病毒感染的动物群很难净化。仙台病毒是国标中大鼠小鼠等实验动物的必检项目,必须排除。为确保实验动物质量符合标准,建立一种快速准确的检测方法就显得尤为重要。
仙台病毒的传统检测方案
仙台病毒的检测利用抗原检测仙台病毒抗体(ELISA),仙台病毒SV可以凝集鸡和豚鼠红细胞(血液凝集反应),凝集作用可以被仙台病毒抗体抑制。
但ELISA存在检测耗时较长,包被抗原较难制备,需要免疫动物制备阳性血清等问题,较为繁琐。
仙台病毒的PCR检测方案
目前,针对仙台病毒的新的分子生物学检测方案是针对核酸RNA的检测方案。如PCR和荧光定量PCR。基础都是检测RNA病毒的核酸序列,且核酸出现扩增和繁殖的时间比产生抗体的时间提前,方便早检测、早筛查、早处理。
实时荧光定量PCR(qPCR)方法有灵敏度较高、直接检测病毒核酸并可以对核酸浓度定量检测等优点。能够快捷、准确地检测样本中仙台病毒的核酸含量。
翼和生物开发的多种病毒鉴定试剂盒——Ⅲ型呼肠孤病毒Reo-3、仙台病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV多重qPCR鉴别试剂盒,包含仙台病毒SV。试剂盒采用多套引物探针,在FAM(Ⅲ型呼肠孤病毒 Reo-3), HEX(仙台病毒SV),ROX(小鼠肝炎病毒 MHV)三个通道检测3种病毒,另外一套引物探针在CY5通道检测内参RNA。该试剂盒具有以下特点:
灵敏:检测灵敏度较高,10 copies/μL可被有效检出。
稳定:全程闭管操作,无交叉污染。
可靠:含内参对照,避免假阴性。
方便:操作简单,一步法检测。
对该方法的特异性、稳定性、重复性、灵敏度进行验证,效果明显。
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GMT+8, 2026-2-13 16:33
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