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嗜肺巴氏杆菌的PCR检测方法

已有 125 次阅读 2026-2-10 16:53 |个人分类:大小鼠病原体检测|系统分类:科研笔记

嗜肺巴氏杆菌的生理特点

 

嗜肺巴氏杆菌是革兰氏阴性小杆菌,主要寄居于啮齿类和免类的上呼吸道。嗜肺巴氏杆菌是实验小鼠和大鼠易感染的病原菌,较难通过有效的方法进行排除。嗜肺巴斯德杆菌(Pasteurella pneumotropica)是国标GB14922-2022中SPF级实验大小鼠必须排除的项目之一,是啮齿类实验动物中重要的巴氏杆菌科物种。嗜肺巴氏杆菌宿主广泛人和啮齿类动物均可感染嗜肺巴氏杆菌,感染可能来自与动物的密切接触或被鼠咬伤。啮齿类动物感染嗜肺巴氏杆菌后可不表现任何病理症状。嗜肺巴氏杆菌与其他病原共感染后出现症状,如支原体、仙台病毒等共同感染加重疾病的过程。

一般来说,嗜肺巴斯德杆菌主要包括两种生物型:Jawetz型(J型)和Heyl型(H型),另外还有一些其他分离株。近年重新分类后,上述两种类型分为:嗜肺啮齿杆菌(Rodentibacter pneumotropicus,即原嗜肺巴斯德杆菌J型) 啮齿杆菌H型(Rodentibacter heylii,即原嗜肺巴斯德杆菌H型)目前的检测方法不对这两种类型进行分类。

 

嗜肺巴氏杆菌的传统检测方法

国标GB/T 14926.12-2001中指出,嗜肺巴氏杆菌是革兰氏阴性小杆菌,嗜肺巴斯德杆菌具有特殊的生化反应,菌体可与相应的免疫血清在玻片上形成肉眼可见的凝集反应,据此可进行该菌的分离培养和检测。

 

嗜肺巴氏杆菌qPCR检测方法

PCR是基于核酸DNA的检测方法,灵敏度高,可在病原检测初期检测到。应用于病原体检测时,检测方法简单,不需要长时间培养,操作性强,可用于筛查。

翼和生物提供嗜肺巴氏杆菌的PCR检测试剂盒,是多重病原同时检测的qPCR试剂盒。多重荧光同时检测鼠棒状杆菌Ck、嗜肺巴斯德杆菌Pp、支气管鲍特杆菌Bb。在必检病原菌联检试剂盒的基础上设计,用于对检出的阳性样本进一步确认所感染病原菌,当然如果研究者怀疑样本感染了上述三种病原,可直接用该鉴定试剂盒进行检测。

本试剂盒采用多套引物探针,在FAM(鼠棒状杆菌 Ck)、HEX(嗜肺巴斯德杆菌Pp)、ROX(支气管鲍特杆菌 Bb)三个通道检测3种病原菌,另外1套引物探针在CY5通道检测内参DNA。该试剂盒具有以下特点:

灵敏:检测灵敏度较高,10 CFU可被有效检出。

稳定:全程闭管操作,无交叉污染。

可靠:含内参对照,避免假阴性。

方便:操作简单,一步法检测。

 



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