1. CHO细胞

中国仓鼠卵巢细胞（CHO，Chinese hamster ovary cells），是1957 年研究者Theodore T. Puck 从中国仓鼠卵巢组织中分离出原始的 CHO 细胞系，是一种实验室常见的贴壁细胞系。随后，衍生出多种具有不同属性的细胞系，常见的有 CHO-K1、CHO-DG44 和 CHO-DXB11 等。CHO-K1，即野生型 CHO 细胞；CHO-DXB11，敲除 CHO-K1 单 DHFR(二氢叶酸还原酶) 等位基因；CHO-DG44，两个 DHFR 等位基因都被敲除。

2. CHO细胞应用

CHO 细胞通常呈上皮细胞样或成纤维细胞样，具有贴壁生长的特性，但经过适应后也可进行悬浮培养。CHO 细胞缺乏脯氨酸合成基因，培养基中需添加 L - 脯氨酸以支持其生长。

CHO细胞的优点：

1、CHO细胞遗传背景清晰；

2、CHO细胞可以适应无血清悬浮培养；

3、CHO细胞表达的重组蛋白质能够获得类似于人源蛋白质的翻译后修饰；

4、已经开发出了多种商业化高效高表达系统。

CHO细胞的应用：

大多数批准的单抗药来源于 CHO 细胞，可应用于各种适应症。

另外CHO细胞系不会合成脯氨酸及表达表皮生长因子受体（EGFR），所以CHO细胞成为研究各种EGFR突变的理想选择。

3. CHO细胞残留DNA

CHO细胞残留DNA是指利用CHO细胞进行生物制药（如生产单克隆抗体、重组蛋白药物等）过程中，最终药物产品中残留的来源于CHO细胞的基因组DNA片段。

作为生物制药产品中的关键杂质，CHO细胞残留DNA其存在可能带来潜在安全风险，因此是药物质量控制的重要指标之一，需严格遵循药典标准进行检测与控制。残留DNA的产生原因是多样的。细胞破裂释放、纯化工艺残留等。

DNA片段化残留可能引起癌变，免疫反应等，所以药物生产过程中需要严格控制其含量。

4. CHO细胞残留DNA的检测方法

DNA片段化残留有多种检测方法，各国的药典都有比较明确的规定。中国药典中规定的检测方法有DNA探针杂交法、荧光染色法、定量PCR法。

杂交发：将特异性单链DNA探针标记后，与吸附在固相膜上的供试品单链DNA杂交，读取杂交结果，与已知含量的阳性DNA对照比对后，可测定外源性DNA残留量。

荧光染色法：双链DNA荧光染料DNA特异结合形成复合物，在一定的DNA浓度范围内荧光强度与DNA浓度成正比，可计算DNA残留量。

定量PCR法：PCR反应过程中可通过荧光标记的探针或荧光染料掺入双链，通过检测荧光数值的变化，从而检测PCR产物量。荧光强度达到一定阈值的Ct值与该体系所含的起始DNA模板量的对数值呈线性关系。根据已知浓度的DNA标准曲线，可测定外源DNA残留量。翼和开发了CHO细胞残留DNA的检测试剂盒。Biowing® CHO 残留 DNA 检测试剂盒用于定量检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中 CHO 宿主细胞 DNA。采用一套引物探针在FAM通道定量检测样品中 CHO 残留 DNA，另外一套引物探针在HEX通道检测内参DNA。该试剂盒具有以下特点：灵敏：检测限可低至1 fg/μL。简单：标曲定量参考品预分装并冻干，绘制标曲简单。可靠：试剂盒配套有CHO DNA 定量参考品，已溯源至国家标准品；抽提加入内参核酸，全过程质量控制。准确：样品加标回收，评估 DNA 提取的效率、回收率和准确度，评估验证分析方法和系统性能，进一步保证结果的准确性。快捷：操作时间短，3 h 内出结果。