狂犬病的实验室诊断(8)

前记: 

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第４版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第12章是《Laboratory diagnosis of rabies(狂犬病的实验室诊断）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第12章 狂犬病的实验室诊断(8)

(Laboratory diagnosis of rabies)​

3 病毒抗原的检测

(Detection of viral antigen 

3.1 直接荧光抗体试验

(The direct fluorescent antibody test)

直接荧光抗体试验 (DFA test, dFAT or FAT) 是狂犬病诊断中最广泛使用的死后检测方法，并得到世界卫生组织 (WHO) 和世界动物卫生组织(OIE) 的推荐 (Goldwasser & Kissling, 1958; World Health Organization, 2018a)。该方法也用于确认细胞培养 (RTCIT) 或为诊断而接种的小鼠脑组织 (MIT) 中是否存在狂犬病病毒抗原。从脑干区域和小脑制备触印涂片，用高级冷丙酮固定，然后用结合异硫氰酸荧光素 (FITC)的一种或多种特异性抗体进行染色。在 DFA test 中，使用荧光显微镜通过其特征性的苹果绿色荧光来识别狂犬病病毒核衣壳蛋白的聚集体。DFA test 具有高度的敏感性和特异性，在理想条件下，收到样本后几小时内即可获得明确结果。然而，DFA test的敏感性高度依赖于所提交脑组织的质量、结合抗体的特异性、显微镜的可靠性以及诊断人员的技能。自溶、狂犬病病毒种类会显著影响DFA test的可靠性，并且在来自接种过疫苗的动物的样本中，其敏感性可能降低。

不精确的尸检操作会对DFA test 产生不利影响。如果检测的不是脑干（中脑、脑桥和延髓）和小脑区域，敏感性可能会降低。因腐败导致的自溶可能破坏抗体结合位点，导致无法检测（假阴性），或者出现自身荧光，使得难以区分特异性荧光与非特异性荧光（假阳性）。在处理脑组织以及被检样本质量方面缺乏标准化，可能导致假阴性结果 (Hanlon, Smith, & Anderson, 1999; McElhinney et al., 2014; Rudd, Smith, Yager, Orciari, & Trimarchi, 2005)。

使用DFA test时可能会出现不确定结果，强烈建议使用替代方法（如核酸检测）进行验证性检测 (Appler, Brunt, Jarvis, & Davis, 2019)。

（未完待续）

相关文章的链接：

权威的大型学术专著《狂犬病（Rabies）》最新版已面世　（https://mp.weixin.qq.com/s/7v3fyBpGaHqHUZbZgPc3fw）

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