博文

狂犬病的实验室诊断(7)

已有 419 次阅读 2026-5-5 09:19 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

狂犬病的实验室诊断(7)

前记:

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第４版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第12章是《Laboratory diagnosis of rabies(狂犬病的实验室诊断）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第12章狂犬病的实验室诊断(7)

(Laboratory diagnosis of rabies)

2. 狂犬病诊断检测的历史

(History of rabies diagnostic tests)

人类和动物狂犬病的临床描述可追溯至四千年前，甚至可追溯至公元前23世纪巴比伦的一篇文献（King, Fooks, Aubert, & Wandeler, 2004）。首个描述的基于实验室的诊断方法源于1903年一位意大利病理学家和微生物学家在脑组织中显微识别出的内基氏 小体（Negri bodies），8（Negri, 1903）。Negri的观察促成了一种组织学染色方法（Seller’s stain，塞勒氏染色）的开发，该方法用于对海马体（hippocampus）及有时其他脑部区域的新鲜未固定样本压片进行染色观察（Sellers, 1923; Young & Sellers, 1927）。然而，感染动物体内并非总能检测到Negri小体，但在当时，与仅基于临床症状的推定诊断相比，其存在提供了相对较好的特异性。在现代狂犬病实验室中，Negri小体染色已很少作为常规操作。

另一种使用了几十年的相对传统的诊断方法是利用小鼠在送检材料中尝试病毒分离（Koprowski, 1966, 1973）。虽然目前在一些狂犬病实验室中仍在使用，但基于伦理和实际原因，在哺乳动物细胞系中进行狂犬病病毒和其他丽沙病毒（lyssaviruses）的体外分离因其更廉价、更快速，已在狂犬病诊断参考实验室中很大程度上取代了体内试验。然而，正是荧光显微镜技术的建立和荧光标记抗体的可用性，催生了直接荧光抗体试验（FAT, DFA test, or dFA），该试验至今仍被视为狂犬病诊断技术的“金标准”，并因其处理速度快、特异性高且成本相对较低而被全球用作主要的狂犬病诊断检测方法（Goldwasser & Kissling, 1958）。

基于核酸检测的狂犬病病毒检测于1991年首次引入狂犬病诊断实验室（Sacramento, Bourhy, & Tordo, 1991; Smith, Fishbein, Rupprecht, & Clark, 1991），现已成为质量保证实验室环境中的常规手段。经验证的分析方法，包括常规（凝胶电泳法）逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和实时RT-PCR（Real-Time RT-PCR），现已获得世界动物卫生组织（OIE）认可用于狂犬病主要诊断，并正迅速取代常规的狂犬病技术（如病毒分离试验），特别是在高通量筛查和监测方面（Marston et al., 2019; OIE, 2018b）。最近，直接快速免疫组化试验（DRIT）和狂犬病侧向层析试纸条（LFA）等技术已得到评估，以便在无法使用荧光显微镜的偏远或野外环境中实现快速狂犬病诊断（Patrick et al., 2019; Servat, Robardet, & Cliquet, 2019）。