基于壳聚糖的口服 dsRNA 递送系统诱导绿后丽盲蝽G 蛋白偶联受体激酶 2 基因沉默及防治

RNA干扰（RNAi）由于其高度特异性而被公认为一种新型的环境友好型害虫防治策略。然而，RNAi 效率在许多刺吸式害虫中相对较低，例如绿后丽盲蝽Apolygus lucorum。因此，迫切需要开发新的有效的 dsRNA 递送方式（图 1）。

图 1. 绿后丽盲蝽口服dsRNA试验

将靶向 G 蛋白偶联受体激酶 2 基因的细菌表达或 T7 合成的 dsRNA 与壳聚糖以 1:2 的质量比混合。壳聚糖/dsRNA 纳米粒子的大小为 69 ± 12 nm，TEM 和 AFM 图像显示典型的球形或椭圆形结构（图 2）。

图 2. 壳聚糖/dsRNA 纳米粒子的表征

壳聚糖纳米颗粒保护 dsRNA 免受核酸酶活性以及 pH 和温度依赖性降解的影响，发现荧光标记的纳米颗粒在植物 (48 小时) (Phaseolus vulgaris) 表面稳定，并被中肠上皮细胞吸收并输送至血淋巴（图 3）。

图 3. 荧光标记的壳聚糖纳米粒子在绿后丽盲蝽若虫中分布

壳聚糖/dsRNA一旦饲喂给绿后丽盲蝽若虫，可有效抑制G蛋白偶联受体激酶2基因的表达（70%），导致死亡率显著增加（50%）、体重减轻（26.54%）和 发育期延长（8.04%）（图 4 ）。

图 4. 壳聚糖/dsRNA饲喂给绿后丽盲蝽若虫的表型分析

基于喂养和壳聚糖介导的 dsRNA 递送方法可能是绿后丽盲蝽防治的新策略，为刺吸式昆虫的基因沉默提供有效工具。

原文链接：

https://doi.org/10.1016/j.pestbp.2023.105481