一、产品简介：

抗坏血酸即维生素C，它是一种高活性物质，参与很多新陈代谢活动。抗坏血酸是生物体内抗氧化体系成员之一，因此抗坏血酸含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标。  还原型抗坏血酸（ASA）可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯琳（BP）反应形成红色螯合物。此物质在534nm波长的吸收值与ASA含量呈正相关，故可用比色法测定。

二、试剂盒组分与配制：

三、需自备的仪器和用品：

酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、无水乙醇、冰和蒸馏水。

四、操作步骤：

建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、预实验样本制备

① 组织样本：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。 4000rpm，4℃离心 10min ，取上清置于冰上待测。

② 液体样本：直接检测。若浑浊，离心后，取上清置于冰上待测。

2、标准溶液的配制：把10mg/mL 的标准品母液用提取液稀释成10 μg/mL的标准溶液备用。

3、预实验上机操作：

① 酶标仪预热30min以上，调节波长至534nm。

② 操作表：

4、正式实验：

① 若预实验测定吸光值大于1.0，可用提取液对样本进行稀释。则稀释倍数D需代入公式重新计算；

② 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

③ 正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。

五、结果计算：

1、按样本质量计算：

AsA(μg/g 质量) =（C标准×V1×ΔA测定÷ΔA标准）÷（W×V1÷V) ×D

               =10×ΔA测定÷ΔA标准÷W×D

2、按液体体积计算：

AsA (μg/mL) =（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准×V1）÷V1×D

=10×ΔA测定÷ΔA标准×D

C标准：标准液浓度，10μg/mL；          V1：加入反应体系中上清液体积，0.2 mL；

V：加入提取液的体积，1.0mL；          W：样品质量（g）；                   

D：稀释倍数，未稀释即为1。

注意事项：

标准品现用现配，若溶液变黄，则不能使用。