比较蛋白组学揭示SLFN5是一种

抑制疱疹病毒转录限制因子

 本文为读后感，原文见文后，读后感作者：李蒙云 

当病毒感染宿主时，宿主的固有防御在核侵染初期就协调抑制病毒的复制和传播，但病毒通过结合和诱导细胞限制因子的降解来破坏宿主的防御。这篇文章中作者提出，在缺乏病毒关键拮抗剂的情况下，通过病毒DNA（vDNA）结合的蛋白可以确定抑制病毒基因表达的宿主因子。单纯疱疹病毒I型（HSV-1）中ICP0蛋白具有泛素连接酶E3的功能域，并且可以促进病毒感染。研究发现ICP0的细胞底物是宿主防御病毒入侵的屏障，但这些底物抑制病毒基因表达的机制尚不清楚。

作者利用iPOND技术，分析HSV-1与Δ ICP0病毒侵染HFF细胞后的蛋白质组，经质谱鉴定和PCA对比分析找到ICP0的潜在底物，发现SLFN5是ICP0的新型底物，并发现在ICP0缺乏时，SLFN5与vDNA结合，同时免疫荧光检测也证明了上述结论。

    为了进一步探究HSV-1感染过程中的SLFN5，作者通过免疫印迹发现，在ΔICP0侵染的细胞中可以分离到SLFN5，而在HSV-1中则分离不到，且SLFN5在全蛋白质组中降低的丰度特征也和已知的ICP0底物类似。同时与已知ICP0的底物蛋白比较表明，SLFN5的降解依赖于ICP0的环指结构域，且ICP0只对SLFN家族中的SLFN5有降低作用。在HSV-1侵染细胞2h后加入MG132（泛素蛋白酶的抑制剂），观察到SLFN5在没有ICP0时积累在病毒基因组上，且与ICP0的其他抗病毒底物类似，这表明SLFN5可能是一种宿主限制因子。当蛋白的合成被cycloheximide抑制时，SLFN5在HSV-1中降解，而在ΔRING中没有太大变化，表明SLFN5是ICP0介导的蛋白酶体降解的靶点。 

为了找到HSV-1在感染宿主时SLFN5降低的原因，作者用Doxycycline诱导表达ICP0，发现ICP0特异性降解SLFN5，而不是依赖其它因子。接下来研究发现ICP0直接与SLFN5核定位相关的C端结合，而不是通过PML核体的降解间接介导SLFN5。同时在缺失SUMO偶联酶UBC9的细胞中并未发现SLFN5的降解，表明ICP0的降解机制与SUMO无关，而体外泛素化实验证明ICP0特异性泛素化降解SLFN5。

在探究SLFN5抑制病毒转录的功能后，作者发现SLFN5不依赖解旋酶的抗病毒活性，而是影响病毒的转录，且通过结合vDNA来阻止RNA聚合酶II的进入，从而抑制病毒启动子的转录。因此作者提出了SLFN5抑制病毒转录复制的模型：在没有ICP0时，SLFN5与vDNA结合，抑制RNA聚合酶II与启动子的结合，从而抑制病毒的转录。在ICP0 存在时，ICP0泛素化降解SLFN5，从而促进病毒基因转录。

原文标题，Comparative proteomics identifies Schlafen 5(SLFN5) as a herpes simplex virus

restriction factor that suppresses viral transcription

原文链接，https://doi.org/10.1038/s41564-020-00826-3