1. 取 500 μL 抗凝血加入 1.5 mL EP 管中。抗凝剂推荐使用 EDTA-Na2 或枸橼酸钠。如果是肝素抗凝，则血液样本不可以长期保存。

2. 洗血：加入生理盐水(或 PBS) 1 mL，混匀，4000 r/min，10 min。弃上层液。重复一次。

3. 溶血：加入相当于压积体积 5.5 倍的溶血试剂(1 mL)。混匀后在 4℃中静置 15 min，血液由浑浊红色变为透明红棕色。 
   溶血试剂：0.144M 的 NH4Cl 和 0.01M 的 NH4HCO3 按 10：1 混合使用。

4. 4000 r/min 离心 10min，弃去上层液。 
   注：溶血的目的是裂解红细胞，离心后将其去除。因为红细胞没有细胞核，不能提供 DNA。

5. 消化：在压积细胞中加入 200 μL 白细胞悬浮液。用枪头吹吸混匀，然后再加 200 μL 白细胞悬浮液，混匀；然后加入 5 μL 浓度为 20 mg/ml 的 proteinase K，混匀；最后加入终浓度为 0.5%的SDS，混匀。置 37℃消化过夜或 56℃消化 3 hrs。

白细胞悬浮液 :

注：加入 SDS 时，要让枪头一边从下到上旋转运动，一边加入 SDS，避免 SDS 集中在液体的某处，消化的目的是破白细胞。