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人用及兽用狂犬病疫苗(6)

已有 347 次阅读 2026-3-24 10:34 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

人用及兽用狂犬病疫苗(6)

前记:

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第４版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第14章是《Human and animal vaccines(人用及兽用疫苗）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第14章 人用及兽用疫苗(6)

Human and animal vaccines

9. 二倍体细胞(Diploid cells)

二倍体细胞在体外培养条件下具有有限的寿命，且携带完整的遗传物质。与原代细胞类似，这类细胞通常保留其来源细胞类型的诸多特征（Barrett et al., 2009）。目前用于疫苗生产的二倍体细胞基本不含所有已知的外源因子（Ma et al., 2015），但在体外传代过程中仍可能发生污染。用于疫苗生产的二倍体细胞必须在药品生产质量管理规范(Good Manufacturing Practice，GMP) 设施中培养。利用人二倍体细胞增殖病毒，有助于缓解原代组织培养应用中存在的诸多难题。支持使用二倍体细胞的核心依据在于，这类细胞会发生衰老且不具有致瘤性。在封闭体系中，可利用已充分鉴定的主细胞库和工作细胞库进行材料的多次扩增传代（Jordan & Sandig, 2014）。

不过，二倍体细胞也存在诸多缺陷，例如在生物反应器中难以规模化培养（尤其是采用微载体培养时），对培养基要求严苛，且在无血清条件下难以增殖（Barrett et al., 2009）。两种知名的人二倍体细胞株WI-38和MRC-5为国际参考细胞株（Hayflick, 1989; Jacobs, Jones, & Baille, 1970）。世界卫生组织推荐人二倍体细胞作为生产病毒疫苗最安全的细胞培养基质之一。

人二倍体细胞狂犬病疫苗 (HDCV) 的生产采用PM 1503 3M株固定RABV，该毒株源自巴斯德最初分离的毒株，由美国国立卫生研究院 (NIH) 保存。多项临床试验证实，HDCV安全且可高效诱导高滴度的RABV特异性病毒中和抗体 (VNAs)（Cox, Klietmann, & Schneider, 1978; Cox & Schneider, 1976; Klietmann, Domres, & Cox, 1978; Kuwert, Marcus, Werner, Iwand, & Thraenhart, 1978; Nicholson & Turner, 1978）。HDCV 是人类疫苗生产史上的里程碑，仅需数次接种即可为高危人群提供预防保护，也可高效用于暴露后预防 (PEP)（Hicks, Fooks, & Johnson, 2012）。接种HDCV 后，狂犬病病毒中和抗体可长期存在，加强免疫能引发回忆应答。HDCV 可诱导产生交叉中和抗体，保护接种者抵御Ⅰ群狂犬病毒感染（Brookes, Parsons, Johnson, McElhinney, & Fooks, 2005; Fayaz et al., 2011）。HDCV 已在全球范围内获批上市。

自 20 世纪 30 年代以来，原代细胞与有限传代细胞在疫苗生产中积累了数十年的大量监管应用经验，这是其核心优势。遗憾的是，HDCV 的全球应用受限于高昂的生产成本。连续细胞系可解决二倍体细胞的部分局限，但也可能带来其他挑战（Jordan & Sandig, 2014）。

10. 连续细胞系

源自动物组织的连续细胞系是生产各类生物制药的重要细胞基质。与原代细胞和二倍体细胞不同，这类细胞具有致瘤潜能且可无限传代。尽管如此，多项研究表明，低于特定传代次数的细胞不具有致瘤性（Furesz, Fanok, Contreras, & Becker, 1989; Horaud, 1992; Levenbook, Petricciani, & Elisberg, 1984; Vincent-Falquet et al., 1989）。连续细胞系可实现病毒的大规模增殖，且生产成本更低（Grachev, 1990），还可构建包含主细胞库、工作细胞库及扩展工作细胞库的规范种子批系统（Barone, Fracchia, Pascuali, & Proglio, 1997）。

疫苗生产中最常用的哺乳动物细胞系之一为Vero细胞系，该细胞系源自非洲绿猴 (AGM) 肾组织（Osada et al., 2014）。作为连续细胞系，Vero细胞已被监管机构广泛认可用于病毒疫苗生产（Barrett et al., 2009），其主要优势在于病毒增殖滴度高，且可获得无外源因子污染的细胞批次。由于Vero细胞具有贴壁依赖性，需在滚瓶、微载体、细胞工厂、CellSTACK、CellCubes、固定床生物反应器等大表面积培养载体上增殖。

纯化Vero细胞狂犬病疫苗 (PVRV) 已于数十年前应用于临床，是狂犬病防控领域的重要进步（Rupprecht, Hanlon, & Slate, 2004）。相较于 HDCV，PVRV 更适合工业化规模化生产。PVRV（商品名Verorab）已在全球 100 多个国家获批上市，累计接种超 4000 万剂（Toovey, 2007）。多项临床研究以0.5 IU/mL抗体滴度为免疫原性阈值评估Verorab，该阈值与临床狂犬病保护效力高度相关。Verorab符合世界卫生组织对肌内注射暴露后预防 (IM PEP) 的标准，可采用Essen程序（5 剂；1-1-1-1-1）和Zagreb程序（4 剂；2-1-1）接种，且其免疫原性不受狂犬病免疫球蛋白 (RIG) 联合使用的影响（Lang et al., 1998）。

新一代无血清PVRV-NG疫苗采用与Verorab和Imovax疫苗同源的灭活PM株RABV制备，符合《欧洲药典》、世界卫生组织及美国食品药品监督管理局 (USFDA) 的质量标准。Ⅲ 期临床试验证实，作为参比疫苗Verorab的升级产品，PVRV-NG疫苗安全且具有良好免疫原性，为狂犬病预防提供了新选择（Li et al., 2013）。