GW6471是一种选择性过氧化物酶体增殖物激活受体 α（PPARα）拮抗剂，对 PPARα 的转录抑制活性 IC₅₀约为 0.24 μM。GW6471（CAS No.：880635-03-0，AbMole，M2746）的突出特点在于，它并非简单占据配体结合口袋发挥拮抗作用，而是通过诱导受体构象重排，主动招募共抑制因子，是解析核受体转录调控与脂质代谢信号通路的经典工具分子。

在结构机制层面，晶体结构研究揭示了GW6471独特的主动拮抗模式：PPARα 被激动剂激活时，配体会与AF‑2螺旋上Tyr464形成关键氢键，使AF‑2螺旋维持活性构象，以此招募SRC‑1等共激活因子，启动下游靶基因转录。GW6471（AbMole，M2746）结合PPARα配体口袋后，分子中的乙基酰胺基团会竞争性破坏Tyr464位点的关键氢键，通过空间位阻效应迫使AF‑2螺旋偏离活性位置、发生构象重排；该构象变化一方面解除共激活因子的结合条件，另一方面在受体表面开辟出更大的结合沟槽，允许SMRT共抑制因子基序稳定嵌入，最终组装形成“受体‑拮抗剂‑共抑制因子”三元抑制复合物，抑制PPARα介导的基因转录。

PPARα 作为核受体家族重要成员，主导肝脏脂肪酸 β‑氧化、酮体合成，是机体响应禁食状态、完成能量代谢重编程的核心转录调控因子。当动物机体处于禁食时，内源性脂肪酸充当配体激活 PPARα，驱动 CPT1A、ACOX1 等脂肪酸氧化关键基因以及 FGF21 等分泌因子转录表达，促使机体由碳水化合物供体切换为脂肪酸供能；借助系统生物学手段，科研人员已经完整绘制出 PPARα 在肝脏代谢网络当中的全基因组转录调控全景。在代谢生理学研究工作中，GW6471（AbMole，M2746）常被用来抑制CPT家族等一系列PPARα下游脂肪酸氧化靶基因的转录表达，以此建立功能缺失表型，解析 PPARα 在全身能量代谢网络当中的调控作用。GW6471的应用还拓展到神经科学研究领域，小鼠经脑室内给药或腹腔注射 GW6471（CAS No.：880635‑03‑0，AbMole，M2746），能够剂量依赖性削弱二十二碳六烯酸（DHA）对小鼠的抗惊厥保护效果。该实验结果提示，脂肪酸发挥神经调节作用，部分依赖于内源性 PPARα 信号通路的激活。在发育生物学方向的研究证实，小鼠胚胎干细胞向心肌细胞的时序分化过程离不开PPARα的活性参与；如果在拟胚体分化的特定时间窗口施加GW6471，能够显著下调α‑actinin、troponin‑T等心肌细胞特异性标志物，直接阻碍心肌细胞的分化进程。

近年来，GW6471（AbMole，M2746）在肿瘤代谢重编程相关研究当中得到大量应用。在 Caki‑1、786‑O 两种肾癌细胞系中，GW6471可诱导细胞发生 G0/G1 周期阻滞并触发凋亡，下调 c‑Myc、Cyclin D1、CDK4 等增殖相关分子；同时该化合物还可以和糖酵解抑制策略产生协同杀伤效果，说明阻断 PPARα 功能会迫使肿瘤细胞脱离脂肪酸氧化，转而高度依赖糖酵解供能，由此暴露肿瘤内在的代谢弱点。在 Caki‑1 异种移植荷瘤小鼠模型体内，GW6471（CAS No.：880635‑03‑0，AbMole，M2746）能够明显抑制肿瘤增殖，降低肿瘤组织内部 c‑Myc 蛋白水平，并且未观测到明显的肝肾损伤毒性。面向肿瘤干细胞方向的探索发现，GW6471 可损伤乳腺癌干细胞微球活力和成球能力，造成细胞能量稳态失衡，诱发代谢应激；GW6471 还能够阻断卵巢癌干细胞内部脂滴‑PPARα 信号轴，抑制 SOX2、Nanog、Oct4 等干细胞干性标志物的表达。在其他肿瘤模型体系中，GW6471（AbMole，M2746）还能够抑制 PI3K/GSK3β/β‑catenin 信号通路，诱导头颈部副神经节瘤细胞发生周期阻滞与 Caspase 介导的细胞凋亡；同时还可抑制胸膜间皮瘤细胞的增殖、迁移与侵袭表型。GW6471（CAS No.：880635‑03‑0，AbMole，M2746）的分子作用机制明确，是脂质代谢、肿瘤代谢领域公认的经典工具。

* 本文所述均为科研试剂，仅供科学研究参考

参考文献及鸣谢

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细胞实验参考

细胞系：MDA-MB-231来源乳腺癌干细胞微球（mammospheres）

方法：Mammospheres derived from MDA-MB-231 cells were treated with GW6471; cell viability, proliferation, spheroid formation, apoptosis (caspase activation), and glucose/lipid metabolism were analyzed after treatment.

浓度：4–16 μM（后续机制实验采用8 μM）

处理时间：72 h

参考文献：Biomedicines. 2021 Jan 28;9(2):127

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

动物实验参考

动物模型：Subcutaneous Caki‑1 xenograft model established in Nu/Nu nude mice

配制：GW6471 is dissolved in PBS containing 4% DMSO

剂量：20 mg/kg, intraperitoneal injection (i.p.)

给药处理：Administration is initiated when tumors reach approximately 5 mm in diameter, once every other day for 4 weeks. Tumor volume is measured weekly, and intratumoral c‑Myc expression is detected at the experimental endpoint

参考文献：Am J Physiol Cell Physiol. 2015 Jun 1;308(11):C890-8

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

* 体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。

支持单位：