GSK2795039（AbMole，M10049）是一种高选择性的小分子NADPH氧化酶2（NOX2）抑制剂，在多种无细胞酶学检测体系中平均pIC₅₀约为6.27。NADPH氧化酶（NOX）家族是细胞内专职产生活性氧（ROS）的跨膜酶复合体，包含NOX1–5及DUOX1/2等成员，其中NOX2（gp91phox）主要表达于吞噬细胞，也广泛存在于血管内皮、心肌及神经胶质细胞中；NOX2的激活依赖p22phox、p47phox、p67phox及Rac等亚基的膜转位组装，激活后催化NADPH将电子传递给分子氧生成超氧阴离子，参与能量代谢与氧化应激。GSK2795039（CAS No.：1415925-18-6，AbMole，M10049）能以NADPH竞争性方式抑制NOX2的催化活性，同时对NOX1、NOX4、NOX5等其他亚型以及黄嘌呤氧化酶、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）均显示良好的选择性（没有表现出抑制活性），是目前应用十分广泛的NOX2选择性抑制剂。

在分子机制层面，GSK2795039（AbMole，M10049）的抑制活性经过了多个细胞系的验证，结果证实GSK2795039能够有效抑制NOX2的活性并限制ROS生成、NADPH和氧气的消耗。在FeSO4联合LPS（Lipopolysaccharides，脂多糖）刺激的BV2小胶质细胞与原代神经元共培养体系中，25 μM GSK2795039处理24 h能显著减少小胶质细胞NOX2来源的ROS释放，降低Cleaved caspase-3阳性的PC12细胞比例并改善神经元存活。

在药代与代谢特征方面，GSK2795039静脉给药后在小鼠与大鼠体内的消除半衰期分别约为0.2 h和2 h，口服生物利用度在小鼠中为10%–54%、在大鼠中约为3%；腹腔给药后脑/血浓度比为0.49–0.83，提示其可透过血脑屏障，适用于中枢神经系统的体内研究。GSK2795039（CAS No.：1415925-18-6，AbMole，M10049）的动物代谢研究显示，其烷基侧链与二氢吲哚环是主要的生物转化位点，且该化合物是醛氧化酶的底物。

在动物实验层面，GSK2795039（AbMole，M10049）被证实给药后能在小鼠体内高效抑制NOX2酶活性。在完全弗氏佐剂（CFA，Freund′s Adjuvant, Complete）诱导的小鼠足底炎症模型中，腹腔注射2 mg/kg和100 mg/kg GSK2795039分别产生约50%和95%的L-012化学发光信号抑制（L 012 是一种基于鲁米诺的化学发光探针，它是一种活性氧（ROS）和活性氮（RNS）的探针，这里可以通过检测超氧阴离子间接检测NOX2的活性） ，抑制效果在给药后24 h完全逆转，证实其作用具有可逆性；在雨蛙素（Cerulein，CAS No.：17650-98-5）诱导的小鼠急性胰腺炎模型中，100 mg/kg腹腔给药两次能使血清淀粉酶水平下降约50%，与gp91phox基因敲除小鼠的表型相当。GSK2795039（CAS No.：1415925-18-6，AbMole，M10049）还在环磷酰胺诱导的小鼠膀胱炎模型（5 mg/kg腹腔注射、24 h内三次给药）中改善排尿功能障碍、减轻膀胱水肿与炎症反应并抑制膀胱组织超氧阴离子生成。上述研究表明，GSK2795039是解析NOX2依赖性氧化应激在炎症、神经损伤及脏器损伤模型中功能的重要工具分子。目前，GSK2795039（AbMole，M10049）已被公认为研究NOX2功能的高效工具，并在血管生物学、神经炎症、肺损伤及代谢性炎症等研究方向有着重要的应用。同时，GSK2795039（CAS No.：1415925-18-6，AbMole，M10049）也是新一代NOX2抑制剂开发中的阳性对照与结构优化起点。

* 本文所述均为科研试剂，仅供科学研究参考

参考文献及鸣谢

[1] Hirano K, et al. Discovery of GSK2795039, a novel small molecule NADPH oxidase 2 inhibitor. Antioxid Redox Signal, 2015, 23(5): 358-374. DOI:10.1089/ars.2014.6202

[2] Yauger YJ, et al. Iron accentuated reactive oxygen species release by NADPH oxidase in activated microglia contributes to oxidative stress in vitro. J Neuroinflammation, 2019, 16(1): 41. DOI:10.1186/s12974-019-1430-5

[3] Padilha EC, et al. NOX2 inhibitor GSK2795039 metabolite identification towards drug optimization. J Pharm Biomed Anal, 2021, 201: 114102. DOI:10.1016/j.jpba.2021.114102

[4] Bedard K, Krause KH. The NOX family of ROS-generating NADPH oxidases: physiology and pathophysiology. Physiol Rev, 2007, 87(1): 245-313. DOI:10.1152/physrev.00044.2005

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[6] de Oliveira MG, et al. Selective pharmacological inhibition of NOX2 by GSK2795039 improves bladder dysfunction in cyclophosphamide-induced cystitis in mice. Antioxidants (Basel), 2022, 12(1): 92. DOI:10.3390/antiox12010092

细胞实验参考

细胞系：BV2 murine microglia co-cultured with differentiated PC12 cells

方法：BV2 microglia were pre-treated with FeSO4 and LPS in the presence of GSK2795039 dissolved in DMSO, and then co-cultured with differentiated PC12 cells to evaluate NOX2-mediated oxidative stress and neuronal apoptosis (cleaved caspase-3 immunostaining). Vehicle control groups received an equivalent volume of DMSO under identical culture conditions.

浓度：25 μM

处理时间：24 h

参考文献：J Neuroinflammation. 2019 Feb 18;16(1):41

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

动物实验参考

动物模型：Male C57BL/6J mice, cerulein-induced acute pancreatitis model

配制：GSK2795039 was dissolved in vehicle (20% DMSO, 20% Tween 80, 60% polyethylene glycol 200) for intraperitoneal injection

剂量：100 mg/kg

给药处理：intraperitoneal injection, twice during the protocol (1 h before the first cerulein injection and 4 h later); acute pancreatitis was induced by 6 hourly injections of cerulein (50 μg/kg)

参考文献：Antioxid Redox Signal. 2015 Aug 10;23(5):358-374

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

* 体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。

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