Everolimus（依维莫司，AbMole）是一种雷帕霉素（Rapamycin）的衍生物，能特异性抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）复合物1（mTORC1）的丝氨酸-苏氨酸激酶活性，调控下游信号通路，包括降低p-p70S6K、p-4EBP1、p-S6K及核糖体蛋白S6（RPS6）的磷酸化水平，诱导自噬（该过程可被3-Methyladenine Chloroquine 或Bafilomycin A1 阻断）、触发G0/G1期细胞周期阻滞、促进凋亡，并影响糖酵解和炎症因子分泌。Everolimus（RAD001）具有抗肿瘤活性，例如在786-0、ACHN等透明细胞癌及乳头状癌细胞系中，1–10 µM 的Everolimus能剂量依赖性地抑制细胞增殖[1]。Everolimus（SDZ-RAD，AbMole）在部分耐药的肿瘤细胞中（如MCF-7:5C和MCF-7:2A），能诱导G1期阻滞（下调cyclin D1、p21），降低ER表达与转录活性、HSP90的水平，并恢复细胞对4-羟基他莫昔芬（4-Hydroxytamoxifen） 的敏感性[2]。

此外，在PI3K/PTEN突变的三阴性乳腺癌CAL-51细胞中，Everolimus（CAS No.：68047-06-3）与Gefitinib（吉非替尼）联用显著抑制mTOR/P70S6K磷酸化及4E-BP1激活，诱导凋亡[3]。Everolimus（依维莫司）还具有抗病毒与免疫调节活性，例如在巨细胞病毒（CMV）感染的细胞模型中，实验人员发现Everolimus通过抑制mTORC1，显著减少感染细胞数量（降至对照组40%），抑制病毒DNA合成与释放[4]；在AGS细胞中，Everolimus能抑制NF-κB通路，减轻幽门螺杆菌诱导的ROS/MDA水平，降低IL-6、TNF-α、IL-8等促炎因子表达及THP-1细胞的黏附[5]。Everolimus还能抑制动物器官移植模型中的免疫排斥反应，例如在肝脏和肾脏移植模型中能够有效抵抗排斥反应，促进Treg生成，增强免疫耐受[6]。

范例详解

Oncogene. 2020 Apr;39(15):3163-3178.

实验人员在该文章中使用了由AbMole提供的Trametinib (JTP-74057，AbMole，M1759) , Chloroquine (磷酸氯喹，AbMole，M2510) , Rapamycin (雷帕霉素，AbMole，M1768) , RAD001 (Everolimus，AbMole，M1909) , and MG132 (AbMole，M1902) 。实验人员探究了胶质母细胞瘤中EGFR-ZNF263信号轴如何通过表观遗传机制沉默SIX3基因。在实验中，Rapamycin 、Chloroquine、RAD001等用于证实mTOR及自噬信号通路在SIX3基因沉默过程中的作用；而MG132 和Trametinib 则分别用于阐述蛋白酶体和MEK通路与SIX3基因沉默的相关性。

图 1. The MAPK pathway is the main downstream effector of EGFR-mediated epigenetic silencing of SIX3[7].

参考文献及鸣谢

[1] Kornakiewicz, A.; Czarnecka, A. M.; Khan, M. I.; et al. Effect of Everolimus on Heterogenous Renal Cancer Cells Populations Including Renal Cancer Stem Cells. Stem cell reviews and reports 2018, 14 (3), 385-397.

[2] Lui, A.; New, J.; Ogony, J.; et al. Everolimus downregulates estrogen receptor and induces autophagy in aromatase inhibitor-resistant breast cancer cells. BMC cancer 2016, 16, 487.

[3] El Guerrab, A.; Bamdad, M.; Bignon, Y. J.; et al. Co-targeting EGFR and mTOR with gefitinib and everolimus in triple-negative breast cancer cells. Scientific reports 2020, 10 (1), 6367.

[4] Tan, L.; Sato, N.; Shiraki, A.; et al. Everolimus delayed and suppressed cytomegalovirus DNA synthesis, spread of the infection, and alleviated cytomegalovirus infection. Antiviral research 2019, 162, 30-38.

[5] Liu, J.; Zhang, F.; Zhang, Z.; et al. Everolimus ameliorates Helicobacter pylori infection-induced inflammation in gastric epithelial cells. Bioengineered 2022, 13 (5), 11361-11372.

[6] Levitsky, J.; Miller, J.; Huang, X.; et al. Immunoregulatory Effects of Everolimus on In Vitro Alloimmune Responses. PloS one 2016, 11 (6), e0156535.

[7] Yu, Z.; Feng, J.; Wang, W.; et al. The EGFR-ZNF263 signaling axis silences SIX3 in glioblastoma epigenetically. Oncogene 2020, 39 (15), 3163-3178.

动物实验参考

动物模型：Transgenic mice expressing the L858R mutation of EGFR

配制：Not mentioned

剂量：10 mg/kg

给药处理：Oral administration

参考文献：Experimental cell research, 2014, 326(2): 201-209.

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。建议制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。