“Wait！住手啊！你确定那真的是静脉？”小鼠尾静脉注射实验，求生手册，来了!

Section.01

实验工具与材料准备

1. 针头大小：小鼠常用 27-30 G (越细越温柔，别用粗针吓鼠鼠！)；

2. 注射量：小鼠单次一般 5-25 mL/kg (超量易栓塞/死亡)；

3. 固定器：毛巾包裹 + 尾夹 (或用恒温箱/固定盒，让鼠放松)；

4. 注射样本处理： 药液要过滤 (0.22 μm 滤膜)、无气泡，细胞悬液要吹打均匀 (防成团！)。

Section.02

如何让血管“现形”？

1. 物理法：用 40-45℃ 温水泡鼠尾 (或烤灯照)，血管扩张会更明显；

2. 化学法：涂少量肝素钠/酒精以扩张血管；

3. 视觉法：黑暗环境下，从尾巴下方打光，血管反光更清晰。

图 1. 使用红外线灯扩张尾静脉^[1]。

(A) 癌细胞静脉注射示意图；(B) 应用红外光扩张尾静脉；(C) 拉伸小鼠尾巴时，可见一条紫色直线；(D) 针尖顺利插入尾静脉。

Section.03

实操“找手感”：

三条静脉一条动脉，

看准再下手！

血管识别：记住“三静一动”

三条静脉：背侧 (最粗)、两侧 (较细，新手慎选)；

一条动脉：腹侧 (颜色偏红，搏动明显，绝对不能扎！)。

图 2.小鼠“三静一动”示意图^[2]。

大鼠尾部横截面解剖图，静脉为蓝色，动脉为红色，尾部两侧的静脉相对较粗，便于采血。

注射步骤 (保姆级分解)

小鼠保定：

可使用鼠类固定器或毛巾等保定小鼠身体，只漏出尾巴；也可将小鼠进行麻醉处理。

消毒/暴露血管：

酒精消毒并用温水泡/照灯等方法暴露血管。

进针：

针头斜面朝上 (进针角度为 15-30°)，轻轻挑起皮肤，如见回血则成功扎进静脉；

推药：

缓慢推注 (约 1 秒/10 μL)，观察尾巴是否鼓包，如鼓包则表明漏液，应该立即停止。

拔针：

轻压止血 (用棉球按住针孔 3 秒)。

图 3.对单只小鼠进行连续血液微量采样^[3]。

小鼠被用一个圆筒固定住，以便能够自由伸展尾巴，使用 30 号针头进行小鼠尾静脉采血

Section.04

细胞栓塞:

一个常被忽略的“致命风险”

为啥会栓塞？

尾静脉注射进的是血液循环，如果推入的细胞悬液中存在细胞团块，这些肉眼看不见的小团体会随血流进入右心→肺动脉→肺毛细血管网。

由于肺毛细血管网的管径极其狭窄 (通常只有 5-10 μm)，这些细胞团块无法通过，会直接卡在肺部微血管中，形成机械性栓塞。这会导致小鼠气体交换受阻、发生急性肺循环障碍，甚至造成小鼠死亡！

解决方案

(1) 细胞悬液：PBS 洗 2 次 + 轻柔吹打 20 次 (用 1 mL 枪吹，别用移液管猛吸)；

(2) 过滤：用 40μm 细胞筛过滤 (去掉团块)；

(3) 注射前：离心 (低速，500 rpm/5 min) 去掉大团。

Section.05

是否成功？

判断&注意事项

成功判断

(1) 尾巴无鼓包 (鼓包 = 漏到皮下)；

(2) 推药顺畅 (阻力小，无“噗嗤”声)；

(3) 小鼠无挣扎/死亡 (注射后 10 分钟内活泼如常)。

避坑注意 

(1) 别反复扎同一位置，易血肿；

(2) 针头别斜插，易刺穿血管；

(3) 药液温度接近体温，冰的会刺激血管痉挛。

表 1. 常见问题排查与答疑

Section.06

常见应用场景

生物大分子递送

核酸药物 (如 siRNA)、质粒 DNA 及脂质纳米颗粒 (LNP) 等生物大分子的体内递送研究常采用小鼠尾静脉注射给药。

近年研究表明，经尾静脉注入包裹核苷修饰 mRNA 的脂质纳米颗粒，可实现肝脏的高效且相对特异性递送——在合适剂量下可使约 70% 的原代肝细胞和约 40% 的库普弗细胞检测到目标蛋白表达，为遗传性肝病、肝靶向蛋白替代及 mRNA 疫苗等研究提供了有力工具。

图 4.mRNA-LNP IV 注射液的实验设计及肝细胞特异性和转染效率的分析^[4]。

活体成像与示踪

在生物医学研究中，小鼠尾静脉注射结合活体成像技术已成为药物筛选、纳米材料评估、细胞示踪及疾病机制研究的重要工具。

通过静脉途径将荧光探针、纳米颗粒、细胞或放射性示踪剂引入循环系统，研究者能够实时、非侵入性地观察其在体内的分布和代谢。

抗肿瘤药物与靶向治疗测试

向尾静脉直接注射肿瘤细胞是建立实验性肺转移模型的经典方法。例如，将食管鳞状癌细胞或乳腺癌细胞注入尾静脉，这些细胞会经过血液循环首先到达肺部，形成转移灶。该模型可用于研究肿瘤细胞的转移能力和评估抗转移药物的疗效。

此外，还可通过静脉给药来评估大分子抗体、细胞治疗 (如 CAR-T) 及新型抗肿瘤药物的体内疗效。

                            图 6. 尾静脉注射 MDA-MB-231 细胞，构建乳腺癌肺转移模型^[6]。

药代动力学 (ADME) 研究

尾静脉注射是小鼠药代动力学研究中最为常用的给药途径之一，因其操作简便、药物吸收迅速且能实现 100% 的生物利用度。通过这一技术，科研人员能够精确评估候选药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄 (ADME) 特性。

全身性疾病&感染模型构建

通过注射特定病原体或致病因子，建立全身性感染或特定系统疾病的模型。如在败血症模型构建中，可通过尾静脉注射脂多糖 (LPS)，模拟革兰氏阴性菌感染引起的全身性炎症反应。

                                                  图 7. 注射 LPS，建立败血症模型^[7]。

产品推荐：

（www.medchemexpress.cn/lipopolysaccharide.html）

Lipopolysaccharides, from E. coli O55:B5 (HY-D1056)，多用于体外细胞诱导炎症模型。

Lipopolysaccharides, from E. coli O111:B4 (HY-D1056A1)

(www.medchemexpress.cn/lipopolysaccharides-from-e-coli-o111-b4.html)

Lipopolysaccharides, from E. coli O111:B4 (HY-D1056A1)，多用于体内动物诱导炎症模型。

Carbon tetrachloride 四氯化碳 (HY-Y0298)

(www.medchemexpress.cn/Carbon_tetrachloride.html)

(HY-Y0298) ，通过交感神经通路诱导急性肝损伤。引起肝纤维化和肝毒性，广泛用于肝脏疾病造模。

SiRNA Negative Control (HY-150150)

(www.medchemexpress.cn/sirna-control.html)

SiRNA Negative Control  (HY-150150) 是一个 21 个核苷酸的 siRNA，可用作阴性对照。

 参考文献：

[1] Giannou AD, et al. Protocol for orthotopic single-lung transplantation in mice as a tool for lung metastasis studies. STAR Protoc. 2023 Dec 15;4(4):102701. 

[2] Wang S, et al. Spinal cord injury modeling: from modeling to evaluation using rats as examples. Front Neurol. 2025 Jun 16;16:1573779. 

[3] Jilek JL, et al. Effects of MicroRNA-34a on the Pharmacokinetics of Cytochrome P450 Probe Drugs in Mice. Drug Metab Dispos. 2017 May;45(5):512-522. 

[4] Everton E, et al. Transient yet Robust Expression of Proteins in the Mouse Liver via Intravenous Injection of Lipid Nanoparticle-encapsulated Nucleoside-modified mRNA. Bio Protoc. 2021 Oct 5;11(19):e4184.

[5] Li J, et al. Stable, Bright, and Long-Fluorescence-Lifetime Dyes for Deep-Near-Infrared Bioimaging. J Am Chem Soc. 2022 Aug 10;144(31):14351-14362. 

[6] Lin Q, et al. Multi-organ metastasis as destination for breast cancer cells guided by biomechanical architecture. Am J Cancer Res. 2021 Jun 15;11(6):2537-2567. Erratum in: Am J Cancer Res. 2025 Nov 25;15(11):5054-5057. 

[7] Ouyang W, et al. A citrullinated histone H3 monoclonal antibody for immune modulation in sepsis. Nat Commun. 2025 Aug 12;16(1):7435.

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