一、产品简介：

土壤蔗糖酶（S-SC）能够将蔗糖水解为相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量、微生物数量及土壤呼吸强度密切相关，可作为评价土壤肥力的重要指标。

土壤蔗糖酶酶解所生成的还原糖与 3, 5- 二硝基水杨酸反应而生成棕红色氨基化合物。颜色深度与还原糖量相关，因而可用测定还原糖量来表示蔗糖酶的活性。

二、试剂盒组分与配制：

三、需自备的仪器和用品：

酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵、天平、可调式移液器、30-50目筛、甲苯和蒸馏水。

四、操作步骤：

建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、预实验样本制备

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；

2、标准溶液的配制：把10mg/mL标准品母液用蒸馏水稀释成0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05mg/mL的标准溶液备用。

3、预实验上机操作：

① 酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm。

② 操作表：

4、正式实验：

① 若预实验测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最高值建议将上清液用蒸馏水适当稀释后再进行测定，低于最低值建议适当增加样本质量W后再进行测定，并将改变后的W和D代入公式计算；

② 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；

③ 正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。

五、结果计算：

1、以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（mg/mL）。

2、S-SC活力计算：

单位定义：每天每g土样中产生1mg还原糖定义为一个酶活力单位(U)。

S-SC活力(U/g土样)=x×V÷W÷T×D=4.06×x÷W

V：反应总体积，0.406mL；          T：反应时间，24h=1d；

W：土壤样本实际取样量，g；        D：稀释倍数，上述反应体系中为10。