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奇异变形杆菌的qPCR检测

已有 360 次阅读 2026-7-30 20:50 |个人分类:大小鼠病原体检测|系统分类:科研笔记

一、菌株基础特征

奇异变形杆菌属于变形杆菌属,菌体呈直杆状,具有周身鞭毛,因此运动性非常活跃是一种重要的件致病菌显著的特征之一是在固体培养基上的“迁徙生长”或“群游”现象。广泛存在环境、啮齿类动物肠道,是大小鼠设施重点监控机会致病菌。

 

二、奇异变形杆菌的危害(实验动物场景)

1)泌尿系统感染核心病原体 菌株高表达尿素酶,造成持续性、复发性膀胱炎、肾盂肾炎

2)不同免疫背景动物差异显著

免疫健全小鼠:多为无症状肠道 / 尿道定植,隐性带菌,持续向外排菌;

免疫缺陷鼠 风险高:易上行感染、发展为败血症、肝脾肿大、腹腔脓性渗出,直接造成动物死亡。

3)干扰动物实验结果 导致实验数据不准、结果不可重复。

 

三、鉴定检测步骤

1. 培养法鉴定

目标菌落特征:在选择性/鉴别培养基上,挑取符合革兰氏阴性杆菌特征可疑菌落进行纯培养和后续鉴定。在35-37°C培养18-24小时后,奇异变形杆菌会呈现特征性的“迁徙生长”现象。这是变形杆菌属(包括奇异变形杆菌)的显著标志。革兰氏染色镜检:挑取菌落进行革兰氏染色。革兰氏阴性杆菌,菌体直杆状可有多形性。

生化反应来鉴定奇异变形杆菌,并与其他变形杆菌(主要是普通变形杆菌)区分:

2. qPCR方法鉴定

当前荧光定量PCR检测方法也是奇异变形杆菌重要检测方法,能够应对环境样本进行检测,对多样样本类型进行检测场景。是对样本进行核酸DNA提取,通过针对性的引物进行扩增,检测样本是否包含奇异变形杆菌的片段。

qPCR方法优势

灵敏度高,可检出低载量隐性带菌样本;

不受迁徙生长干扰,无需细菌纯化,缩短检测周期;

适用场景:哨兵鼠粪便、垫料环境样本、感染动物组织溯源(肾、膀胱、血液)、无菌环境微生物监控;

可实现高通量筛查,适合设施月度 / 季度常规监测。

商业化的检测试剂盒方案

翼和生物 大小鼠病原体多重 qPCR 检测试剂盒 Biowing®Common Bacteria Primer&Probe 能够匹配到奇异变形杆菌的DNA识别奇异变形杆菌保守基因;单管多重联检多种大小鼠常见致病菌,如金葡、嗜肺、铜绿、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌,奇异变形杆菌等)。

试剂盒产品检测优势:

整个流程大概4小时出结果,一次提取核酸同步筛查多个病原,大幅减少样本处理工作量、降低检测成本;可区分奇异变形杆菌与普通变形杆菌,避免交叉假阳性。



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