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实验方法| 文献抄读|
RAW264.7细胞的培养方法
戴波 2019-8-6 11:22
RAW264.7 细胞的培养方法 1. 细胞培养 RAW264.7 细胞在含 10 ％的 新生小牛血清 及 100   U/m L 青霉素、链霉素的 DMEM 高糖培养液中进行培养，培养箱培养条件设定为 5 ％ CO 2 ， 37 ℃，隔天换液， 每日观察细胞的生长状况。 2. 细胞传代 待 RAW264.7 细胞生长至 70 ～ ...
个人分类: 实验方法|31004 次阅读|没有评论
Real time PCR引物设计原则
戴波 2019-8-6 11:10
Real time PCR 引物设计原则 1 、 引物长度（ primer length ）为 18-27bp （ 18-30bp ） ; 2 、 Tm （退火温度）为 55~65 ℃ （ 55 ℃～ 75 ℃），尽量保证上下游引物 Tm 值一致，二者差异最好不要超过 5 ℃； 3 、 GC 含量（ composition ）为 40-60% ，上下游引物的 GC 含量不能相差太大，四种碱基要均 ...
个人分类: 实验方法|7983 次阅读|没有评论
Western blotting 实验笔记总结
戴波 2019-8-6 11:06
1.液体的配制: （1）Tris-甘氨酸电泳缓冲液：称取Tris 3.03 g，甘氨酸14.4 g，SDS 1 g，加双蒸水溶解，定容至1 L。 （2）转印缓冲液：称取Tris 2.272 g，甘氨酸10.8 g，量取甲醇适量（依据目的蛋白分子量而定），加双蒸水溶解，定容至750 mL。 （3）TBST：称取Tris 2.4&# ...
个人分类: 实验方法|3873 次阅读|没有评论

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