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狂犬病免疫力检测(10)

已有 285 次阅读 2026-7-10 23:13 |个人分类:狂犬病防治|系统分类:科普集锦

狂犬病免疫力检测(10)

前记:

目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病：科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第4版）已于2020年5月面世。

该书共有22章，其中第13章是《Measures of rabies immunity(狂犬病免疫力检测）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。

第13章狂犬病免疫力检测(10)

（Measures of rabies immunity）

2 狂犬病血清学方法(7)

(Rabies serology methods)

2.2 ELISA、IFA 和免疫层析检测 (3)

（ELISA, IFA, and immunochromatographic assays）

阻断ELISA方法的电化学发光(ECL)改良版采用了底部装有系列电极的微孔板。在电极间施加电流可使化学能配体结合反应产生发光信号。通过对该信号进行定量测定，可将测量结果转换为抗体浓度。该方法已应用于蛋白质测量，与传统ELISA方法相比，具有灵敏度更高、出结果更快的潜力 (Guglielmo-Viret, Attree, Blanco-Gros, & Thullier, 2005; Ma, Niezgoda, Blanton, Recuenco, & Rupprecht, 2012)。

用于检测RABV抗体的免疫层析检测法适用于野外工作以及需要低技术含量筛查方法的地区。通过将 ELISA 的原理应用于吸收性试纸条，检测过程被简化为样品与检测试剂按顺序沿直线相互作用。一种用于检测 RABV 抗体的该类型方法，要求在将混合物加入试纸条的吸收材料之前，先将血清样品与灭活病毒混合。随后混合物向前流动，遇到标记的anti-RABV 抗体，该抗体会与任何未结合的灭活 RABV 结合。混合物继续流向试纸条上固定有检测抗体的两个区域（线条）；第一种检测抗体针对 RABV 特异，第二种检测抗体针对标记的 anti-RABV 抗体特异。采用这种设计，如果混合物中含有与标记的 anti-RABV 抗体结合的灭活 RABV，第一条试纸条处将显色，表明样品中没有足够的 anti-RABV 抗体来结合混合物中的灭活 RABV。如果样品含有 anti-RABV 抗体，则标记抗体将通过第一条试纸条，并被标记的 anti-RABV 抗体捕获，从而在第二条试纸条处显色。结果判定为阳性（仅可见第二条线）或阴性（第一和第二条线均可见），以此确定测试血清样本中是否存在 anti-RABV 抗体。界定阳性或阴性的抗体水平由检测设计设定和定义，只能通过血清样品的浓度或稀释度来改变。其简便性和可携带性使得只需极少的教育和培训即可由操作人员使用；然而，与实验室环境下的检测一样，为确保结果准确，仍需注意检测的正确操作。侧向层析检测适用于即时检测 (point-of-care) 场景，在此类场景中，初步的快速筛查结果将决定是否需要采取进一步行动，例如追加检测或接种疫苗 (Nishizono et al., 2012)。一项关于菲律宾、泰国和日本犬只狂犬病抗体血清流行率的比较研究中描述了免疫层析即时检测设备的应用 (Manalo et al., 2016)。该论文还描述了该设备针对 RFFIT 的验证情况，证明了其在不同实验室间具有相似的 NPV、PPV、一致性和重现性。