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一旦实验动物自身携带了一些病毒、细菌、真菌和寄生虫,不仅可能导致实验失败以及实验数据失真,还可能造成大量科研资源的浪费,延长了实验周期,实验动物质量影响着实验的结果和数据的可信程度。因此,动物房需要定期对实验动物进行病原微生物的检测。
荧光定量PCR成为用于检测病毒感染的常用的方法。荧光定量PCR检测具有高灵敏度、高特异性、操作方便等特点。分子核酸检测可以在疾病早期检测到病毒感染,特异性高,也得到了广泛的应用和重视。
不同的病原微生物在体内主要定植的部位不同,多种样本类型都可以进行同种病原微生物的检测。对于大多数病原微生物的检测来说,粪便\盲肠内容物 和 气管\口咽拭子是一个比较好的选择,一是取样方便,二是可以检查多种病原微生物。
检测项目 检测样本类型
沙门菌 回盲肠内容物、粪便、肛拭子
支原体 气管、肺、鼻咽拭子
鼠棒状杆菌 鼻咽/口咽拭子、病灶分泌物、脓汁
泰泽病原体 粪便、肝
嗜肺巴斯德杆菌 气管、鼻咽/口咽拭子、病灶组织、脓汁、粪便
肺炎克雷伯杆菌 回盲肠内容物、病灶组织
绿脓杆菌 回盲肠内容物、粪便、病灶组织
念珠状链杆菌 鼻咽/口咽拭子、病灶分泌物、脓汁
金黄色葡萄球菌 回盲肠内容物、病灶组织/分泌物
肺炎链球菌 鼻咽/口咽拭子、病灶组织/分泌物
乙型溶血性链球菌 呼吸道/病灶分泌物、脓汁
啮齿柠檬酸杆菌 回盲肠内容物
肺孢子菌属 气管、肺、口咽拭子
牛棒状杆菌 皮肤拭子、皮屑/痂皮、皮肤、粪便
小鼠肝炎病毒 盲肠内容物、粪便、肝
仙台病毒 口咽拭子、鼻拭子、肺、气管
小鼠肺炎病毒 口腔拭子、气管、肺
呼肠孤病毒Ⅲ型 盲肠内容物、粪便、肝
小鼠细小病毒MVM株 盲肠内容物、粪便、肾、脾、肝
汉坦病毒 粪便、肺、肾、脾
鼠痘病毒 盲肠内容物、粪便、肝、脾
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 粪便、脑
小鼠脑脊髓炎病毒 盲肠内容物、粪便、肝、脾
多瘤病毒 盲肠内容物、粪便、肾、脾
小鼠诺如病毒 盲肠内容物、粪便
支气管鲍特杆菌(败血症波氏杆菌) 鼻咽/口咽拭子、肺
大鼠细小病毒(KRV和H-1株) 盲肠内容物、粪便、肾、脾、肝
大鼠冠状病毒/涎泪腺炎病毒 口腔拭子、唾液腺
荧光定量PCR成为用于检测病毒感染的常用的方法。不同的荧光标记物也使得多重检测成为可能,比如一个反应体系内可见检测多重荧光FAM、HEX、ROX 荧光,每种荧光探针标记1-3种病毒,从而可以实现一个孔中多种病毒的检测。 翼和生物开发了多款试剂盒。联检试剂盒中一个荧光通道可以同时检测 2-3 种病原体,但是不进行具体病原的鉴定,也就是说一旦某个荧光通道有信号阳性,那么该荧光对应的这 2-3 种病原体都有可能是阳性。鉴定试剂盒中一个荧光通道只鉴定一种病原,所以可以通过荧光信号直接判断感染的具体病原体。联检试剂盒可以与鉴定试剂盒搭配使用。
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