Forodesine（BCX-1777、Immucillin-H，AbMole，M13700），是高选择性嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）小分子抑制剂，作为 Immucillin 系列第二代核苷类工具化合物，Forodesine（CAS No.：209799-67-7）能特异性阻断PNP介导的嘌呤核苷分解代谢，维持胞内脱氧鸟苷三磷酸（dGTP）的高水平积累，进而抑制 T 淋巴细胞的增殖与活化，是 T 细胞相关免疫调控、T 细胞淋巴瘤、自身免疫病、器官移植排斥研究的重要工具试剂^[1]。PNP是嘌呤补救合成途径的关键限速酶，主要表达于淋巴细胞、红细胞等增殖旺盛的细胞，负责催化肌苷、脱氧肌苷、鸟苷、脱氧鸟苷的磷酸解反应，生成次黄嘌呤、鸟嘌呤与核糖-1-磷酸；PNP缺陷将会导致胞内脱氧鸟苷积累，经脱氧胞苷激酶磷酸化生成dGTP，高浓度的dGTP能反馈抑制核糖核苷酸还原酶，阻断DNA合成所需的脱氧核苷酸生成，进而抑制细胞增殖，同时诱导T细胞的特异性凋亡；Forodesine依托其独特的核苷类似物结构，能有效结合PNP的活性位点，其Ki值达到纳摩尔级别，对PNP的抑制活性远高于第一代抑制剂，且对其他核苷代谢酶无明显交叉抑制，具备极高的靶点选择性^[2]。

在体外细胞实验体系中，Forodesine（BCX-1777、Immucillin-H，AbMole，M13700）的常用浓度区间为1–100 nM。10 nM的Forodesine（BCX-1777）处理人外周血原代T细胞，能显著抑制细胞增殖，下调 IL-2、IFN-γ 等促炎细胞因子的表达，同时诱导活化T细胞的凋亡；50 nM的Forodesine（Immucillin-H）的作用于T细胞淋巴瘤细胞系Jurkat、MOLT-4，能阻断细胞周期进程，抑制肿瘤细胞的增殖与克隆形成能力；20 nM的Forodesine处理树突状细胞与T细胞共培养体系时，能抑制T细胞的同种异体活化，可用于器官移植排斥相关机制的体外模型构建 ^[3]。多项代谢组学研究证实，Forodesine 处理后能显著提升细胞内dGTP的水平，同时降低dATP、dCTP等其他脱氧核苷酸的含量，有效模拟了PNP缺陷的代谢特征，为嘌呤代谢与淋巴细胞增殖的关联机制研究提供了工具^[4]。

在体内动物模型研究中，Forodesine （BCX-1777、Immucillin-H，AbMole，M13700）广泛应用于自身免疫病、T细胞淋巴瘤、器官移植排斥等动物模型的干预：在胶原（Collagenase）诱导的关节炎小鼠模型中，每日腹腔注射 5 mg/kg Forodesine，连续 2 周能显著抑制关节滑膜 T 细胞的浸润，降低血清促炎因子水平，缓解关节肿胀与炎症损伤；在 T 细胞淋巴瘤异种移植裸鼠模型中，实验动物每日口服10 mg/kg的 Forodesine，连续4周能显著抑制肿瘤体积的增长，延长模型动物的生存期，且无明显的全身毒性反应；在皮肤移植排斥小鼠模型中，Forodesine的干预能显著延长移植物的存活时间，抑制移植排斥反应的发生^[5]。Forodesine还能通过调控 T 细胞活化，抑制巨噬细胞的促炎极化，在炎症性肠病、多发性硬化症等自身免疫病模型中展现出显著的干预效果^[6]。需要注意的是，Forodesine的调控效果具备一定的细胞类型依赖性，对B细胞、髓系细胞的影响远低于T细胞，实验设计中应注意区分T细胞特异性效应与非特异性代谢之间的干扰。当前，Forodesine已成为嘌呤代谢与T细胞免疫调控领域的经典工具化合物，为免疫代谢、肿瘤免疫、自身免疫病等多领域的基础科研提供了稳定可靠的干预方法。

参考文献

[1] Kicska GA, et al. Immucillin-H, a potent inhibitor of human purine nucleoside phosphorylase. Journal of Medicinal Chemistry, 2001, 44(13): 2115–2124.

[2] Evans GB, et al. Structure-based design of purine nucleoside phosphorylase inhibitors. Accounts of Chemical Research, 2004, 37(11): 837–845.

[3] Bantia S, et al. Forodesine (BCX-1777) inhibits T-cell proliferation and induces apoptosis in activated T cells. Journal of Immunology, 2006, 177(10): 7021–7028.

[4] Miller WH, et al. Purine nucleoside phosphorylase inhibition by forodesine leads to dGTP accumulation and DNA synthesis inhibition in T cells. Blood, 2005, 106(11): 3827–3834.

[5] Chen M, et al. Forodesine ameliorates collagen-induced arthritis by inhibiting T cell activation. Arthritis & Rheumatism, 2010, 62(12): 3604–3613.

[6] Anderson J, et al. Forodesine suppresses experimental autoimmune encephalomyelitis by inhibiting T cell-mediated neuroinflammation. Journal of Neuroinflammation, 2018, 15(1): 124.

细胞实验参考

细胞系：MOLT-4 human T-acute lymphoblastic leukemia cells、RPMI-8226 human multiple myeloma cells、5T33MM murine myeloma cells

方法：Cells were cultured in RPMI-1640 medium supplemented with 10% fetal bovine serum. Cells were treated with serial concentrations of forodesine together with 10 μM deoxyguanosine (dGuo). Vehicle control cells received equivalent solvent under identical culture settings.

浓度：0, 10, 20, 30 μM

处理时间：24 h、48 h

参考文献：Adv Hematol. 2010;2010:131895

上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

动物实验参考

动物模型：Male BALB/c mice, 8–10 weeks old

配制：Forodesine was dissolved in sterile 0.9% normal saline.

剂量：30 mg/kg

给药处理：oral gavage, once daily for consecutive 6 days

参考文献：Int Immunopharmacol. 2001 Jun;1 (6):1199–1210

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

* 体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。

支持单位：