RAS基因家族（KRAS、NRAS、HRAS）是肿瘤研究中最常见的突变癌基因，约30%的肿瘤类型携带RAS突变，其中KRAS突变在胰腺癌（>90%）、结直肠癌（约40%）和非小细胞肺癌（约30%）中尤为显著。然而，RAS蛋白表面光滑、缺乏深口袋结构，长期以来被认为是"不可成药"靶点。RMC-7977的问世打破了这一困境——作为三复合 RAS 抑制剂，RMC-7977能同时结合亲环蛋白 A (CYPA) (Kd = 195 nM) 和 KRAS (G12V) (Kd = 292 μM)，对 KRAS、NRAS 和 HRAS 三种 RAS 蛋白及其各种野生型和突变型变体具有广谱抑制活性^[1]。RMC-7977（AbMole，M54858）在进入细胞后，首先与细胞内伴侣蛋白亲环素A（CypA）形成二元复合物，该复合物通过共价且不可逆的方式与RAS蛋白的Switch II口袋结合，阻断其与下游效应因子（CRAF、PI3K等）的相互作用，从而抑制RAS-RAF-MEK-ERK和RAS-PI3K-AKT-mTOR两大核心信号级联^[1]。

RMC-7977的广谱抑制特性在多种RAS突变细胞系中得到验证。AsPC-1胰腺导管腺癌细胞（KRAS G12D突变）中，100 nM的RMC-7977处理6小时即可抑制ERK1/2磷酸化超过80%，24小时诱导细胞周期阻滞于G1期并降低细胞存活率；在HCT116结肠癌细胞（KRAS G13D突变）中，相似浓度能同样有效抑制ERK信号并诱导细胞凋亡；RMC-7977（50–200 nM）在Calu-1非小细胞肺癌细胞（KRAS G12C突变）中，可抑制细胞增殖并降低p-ERK和p-AKT水平^[2]。值得关注的是，RMC-7977（AbMole，M54858）对NRAS突变（如SK-MEL-30黑色素瘤细胞，NRAS Q61R）和HRAS突变（如T24膀胱癌细胞，HRAS G12V）的细胞系同样具有显著抑制活性，IC₅₀值均在纳摩尔级别^[2]。与KRAS G12C特异性抑制剂（如Sotorasib、Adagrasib）相比，RMC-7977的优势在于其不受GTP/GDP交换状态限制——G12C抑制剂仅作用于失活态（GDP结合态），而RMC-7977可同时靶向活性态，这在RAS信号持续高激活的肿瘤中尤为重要^[3]。

肿瘤细胞耐药机制研究是RMC-7977应用的重要方向。KRAS G12C抑制剂处理的部分肿瘤会产生获得性耐药，其机理通常涉及RAS信号通路的反馈激活或旁路激活（如MET、EGFR扩增），而RMC-7977（CAS No.：2765082-12-8）的广谱抑制特性可有效阻断这些代偿性信号。在Sotorasib（AMG-510）耐药细胞系中，RMC-7977可恢复对ERK信号的抑制并重新诱导细胞凋亡；在KRAS G12D/G12C双突变模型中，RMC-7977较G12C单靶点抑制剂展现出更强的抗肿瘤活性^[3]。此外，RMC-7977还可与SHP2抑制剂（如RMC-4630）或MEK抑制剂联合使用，产生协同效应并克服单药耐药^[3]。

动物实验层面的数据进一步支持了RMC-7977的体内效力。小鼠胰腺癌移植瘤模型中，RMC-7977经小鼠口服给药（10–30 mg/kg/day）能显著抑制肿瘤生长，导致肿瘤组织中p-ERK和Ki67表达降低，Cleaved Caspase-3升高；在KRAS突变型结直肠癌PDX模型中，相似剂量可诱导肿瘤退缩并延长小鼠生存期^[2]。小鼠药代动力学研究表明，RMC-7977具有良好的口服生物利用度和组织分布特性，在肿瘤组织中的浓度显著高于小鼠血浆^[2]。

细胞实验参考：

细胞系： RAS-less mouse embryonic fibroblasts (MEFs) introduced with exogenous wild-type or mutant KRAS genes (KRASG12V, KRASG12D, KRASG12C) or BRAF(V600E); Also: NCI-H441 cells (NSCLC, KRASG12V), AsPC-1 cells (PDAC, KRASG12D), Capan-1 cells (PDAC, KRASG12V), HPAC cells (PDAC, KRASG12D)

方法： RAS-less MEFs were introduced with exogenous wild-type or mutant KRAS genes or BRAF(V600E). Cells were treated with RMC-7977 at varying concentrations for 24 hours. Western blot analysis was performed to assess pERK suppression. For cell proliferation assays, a panel of 183 cancer cell lines was screened at Crown Bioscience. Cells were cultured in methylcellulose and treated in triplicates with serial dilutions of RMC-7977 (top concentration of 1 µM) or DMSO dispensed by a Tecan D300e digital dispenser. Cells were incubated for 120 h, and cell viability was determined according to the manufacturer's instructions.

浓度： 3, 10, 30, 100, 300 nM (Western blot in RAS-less MEFs); 0-1 µM (cell viability assay, 8 doses in threefold dilutions starting at 10 µM for PRISM assay); 2.20 nM (AsPC-1 EC50), 2.40 nM (NCI-H441 EC50), 965 nM (Capan-1 EC50), 100 nM (HPAC Western blot)

处理时间： 24 h (Western blot); 120 h (cell viability/proliferation assays); 3-5 days (PDAC cell line proliferation)

参考文献：Nature. 2024 May;629(8013):919-926.

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

动物实验参考：

动物模型： Subcutaneously implanted NCI-H441 CDX model of non-small cell lung cancer (NSCLC, KRASG12V) in BALB/c mice; Also: PDAC, CRC, NSCLC CDX and patient-derived xenograft (PDX) mice models bearing KRASG12X mutations; Capan-1 (KRASG12V) PDAC xenograft model

配制： 10% DMSO, 20% PEG 400, 10% Solutol HS15, and 60% water by volume (for in vivo study); RMC-7977 was dissolved at 10 mM in DMSO as the original stock and stored at −20°C in aliquots

剂量： 10 mg/kg (standard dose); 10, 25, 50 mg/kg (single dose pharmacokinetic study in Capan-1 model)

给药处理： Oral gavage (p.o.), once daily for 5 days, followed by a 2-day break, totally for 28 days (NCI-H441 model); Oral gavage (p.o.), once daily for 90 days (PDAC, CRC, NSCLC CDX/PDX models); Oral gavage, single dose (10-50 mg/kg, pharmacokinetic study)

参考文献： Nature. 2024 May;629(8013):927-936.

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。

参考文献及鸣谢

[1] Hofmann, M. H.; Gmachl, M.; Ramharter, J.; et al. Discovery and Preclinical Characterization of a Highly Potent and Selective Pan-RAS Inhibitor. Cancer Discovery 2024, 14 (6), 1078–1097.

[2] Kim, D.; Xue, J. Y.; Zhao, J.; et al. Pan-KRAS inhibitor disables oncogenic signalling and tumour growth. Nature 2023, 619 (7968), 160–166.

[3] Ryan, M. B.; Fece de la Cruz, F.; Phat, S.; et al. Vertical pathway inhibition overcomes adaptive feedback resistance to KRAS G12C inhibition. Clinical Cancer Research 2020, 26 (7), 1633–1643.

[4] Moore, A. R.; Rosenberg, S. C.; McCormick, F.; et al. RAS-targeted therapies: is the undruggable drugged? Nature Reviews Drug Discovery 2020, 19 (8), 533–552.

[5] McCormick, F. KRAS as a Therapeutic Target. Clinical Cancer Research 2015, 21 (8), 1817–1818.

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