Hippo信号通路主要调节细胞增殖及凋亡，控制器官大小。这个名字来源于其通路中的关键激酶Hippo（Hpo)，该基因突变可能导致癌症发生。Hpo通路包含一系列激酶级联反应，Hpo（MST1/2）蛋白激酶磷酸化另一个蛋白激酶Wts（LATS1/2）。Wts也可以被Msn和Hppy激活（MAP4K1-7）。活化的Wts进一步导致Yki磷酸化。 哺乳动物中Yki有两个同系物YAP和TAZ。YAP本身不能和DNA结合，其需要与转录因子p73，Runx2及TEADs等结合，之后定位于细胞核，调节靶基因表达。磷酸化的YAP失活，不能与转录因子结合定位于细胞核，不能发挥转录调控作用。Hippo 信号的激活能够促进 LATS 激酶的激活，LATS 通过抑制转录共激活蛋白 YAP 和 TAZ 的活性来控制基因表达。当 Hippo 信号下调或通路上游分子发生突变时，表达增加的 YAP 和 TAZ 将会促进细胞增殖，使其不受控制，继而发展成恶性肿瘤。

（图片来源：Hippo–YAP/TAZ signalling in organ regeneration and regenerative medicine)

室管膜瘤患者中存在YAP融合蛋白，包括YAP1-MAMLD1和C11ORF95-YAP1。YAP1-MAMLD1融合蛋白可能导致肿瘤发生，但是C11ORF95-YAP1是否有类似的功能尚不清楚，本文就对此展开了研究。

首先，作者分析发现，室管膜瘤患者中HIPPO信号上有分子常发生突变，YAP、TAZ及下游分子常表达增加，相关性分析建立了HIPPO信号抑制与室管膜瘤的联系。此外为了建立HIPPO信号与室管膜瘤发生的因果关系，作者敲除了LATS1/2基因，导致YAP,TAZ不能被磷酸化，其活性增强，促进小鼠室管膜瘤形成。

YAP激活后与转录因子结合，定位于细胞核发挥转录调控作用。作者过表达野生型YAP或激活突变的YAP（YAP-S112A，可定位于胞核）均不能促进小鼠室管膜瘤形成，说明YAP核定位并不导致室管膜瘤形成。

但是表达YAP1-MAMLD1和C11ORF95-YAP1融合蛋白的小鼠全部形成室管膜瘤。体内、体外实验均证实，YAP1-MAMLD1和C11ORF95-YAP1融合蛋白具有强致瘤性，并且形成的室管膜瘤特征与人类相似。

作者通过在细胞及肿瘤组织样本中观察YAP1-MAMLD1和C11ORF95-YAP1融合蛋白定位发现，其在核仁具有明显的点状定位。而野生型YAP或激活突变的YAP在核内定位较少，这可能是其不能诱导肿瘤形成的原因。

接着作者分析发现，YAP融合蛋白在核内发生液液相分离，形成明显的液滴状结构，并且液滴中招募了大量的TEAD1和TEAD3，导致对下游靶基因持续稳定调控激活，促进肿瘤进展。并且YAP融合蛋白形成液液相分离的无序结构域（IDR）对于肿瘤形成至关重要。YAP-M蛋白可能由多个YAP融合分子组成，这些分子通过低复杂性的IDR结构域相互作用，促进蛋白质寡聚化，维持其稳定性及相分离液滴形成。

通过转录组分析发现，YAP-M可以抑制PRC2活性，并且促进了IPPO, MYC, NF-kB 及 TGFβ 信号等致癌程序。通过表观遗传学研究发现，YAP-M相分离通过将转录共激活因子BRD4和MED1 ，转录机器，超级增强子等元件集中在凝聚体中，从而提高了转录效率及特异性，促进了致癌基因高效表达。利用JQ1靶向BRD4可以抑制室管膜瘤演进。

（注：共激活因子BRD4和MED1 在超级增强子区域富集，他们通过调控关键基因表达发挥作用）

这项研究不仅揭示了YAP融合蛋白的致癌机理，同时也为HIPPO信号在肿瘤中的作用提供了新的认识，YAP在肿瘤中的作用可能主要依赖其转录调控作用，而YAP融合蛋白相分离通过招募一系列转录调控因子或元件，极大地提高了这种功能，并足以诱导肿瘤形成，其强大的功能令人震撼。

基于此，我脑海中产生了一个疑问，YAP蛋白本身有没有相分离的能力，如果其本身不能发生相分离，那么其在肿瘤中的作用有限，可能仅仅是一些增强后促进作用，如果其具备相分离的能力，那么在特殊细胞内环境下，YAP入核增加，含量足够多时，核内环境或信号促使YAP在核内形成相分离可能会对肿瘤形成发挥更为重要的作用。