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分析一组图片的荧光强度,本质上是将图片通过拆分通道得到目标通道的灰度图像进行灰度值分析。在组间比较荧光强度,需要确保拍摄图片时参数一致。
分析步骤:
1,打开一张RGB图片,Image--Color---split channel,得到三个通道的灰度图像。
选中需要分析的目标通道图片。
2,Image--Adjust--Threshold,改变阈值,选中图片中信号区域,例如,我统一设置为18-255.
3,设置分析参数,Analyze--Set Measurement,选择平均灰度值。
4,点击Analyze-Measure即可得到相对荧光强度。
以上是分析整张图片的平均荧光强度,如果需要对特定区域进行分析或者更加精确的得到某些细胞的荧光强度,可以按照下面的操作先选取ROI。
1,打开图像后,选择ROI。
2,Analyze--Tools--ROI Manger ,将选择的ROI添加到管理面板,拆分通道后选择需要分析的通道,再点击面板中的ROI,就选中了目标区域。
3,点击Analyze-Measure即可得到相对荧光强度。
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GMT+8, 2024-11-16 03:20
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