在细胞培养实验中，胎牛血清（FBS）是最常用的培养基添加剂之一。然而，从屠宰场收集的胎牛血清可能携带一种重要的病原体——牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhea Virus, BVDV）。这一污染源长期存在，对细胞生物学研究和生物制药生产构成持续的威胁。

日本大学兽医流行病学实验室的研究团队对来自新西兰、澳大利亚和多米尼加共和国的2758份胎牛血清进行了系统调查，结果于2015年发表在Journal of Veterinary Medical Science。该研究发现，0.91%的FBS样本中可分离出活BVDV，另有1.60%的样本检出BVDV抗体。

这些数据意味着，每100份市售胎牛血清中，约有1份可能携带活病毒。考虑到商业FBS生产过程中通常将成百上千头胎牛的血清混合在一起，BVDV污染的潜在影响范围远不止1%。

2025年，日本研究团队在Journal of Veterinary Medical Science上发表了一项关于BVDV污染细胞系的研究。该研究明确指出，来源于胎牛血清的BVDV污染是细胞生物学实验中的主要障碍。

BVDV属于泛病毒科瘟病毒属，是一种有包膜的单股正链RNA病毒。它在细胞培养中的污染具有以下特征：

第一，污染具有隐蔽性。与细菌和支原体污染不同，BVDV感染通常不引起明显的细胞病变效应（非细胞致病型BVDV），细胞在显微镜下可能看起来完全正常。研究团队在对BL3.1、EBTr、A26、FLK-BLV和CC81等五种细胞系进行检测时，发现这些细胞系长期存在持续的BVDV感染而未被察觉。

第二，污染后果严重。BVDV感染可抑制宿主细胞的先天免疫应答，干扰干扰素信号通路，从而影响细胞对其它病毒感染的敏感性。这不仅会改变细胞培养实验的结果，还对病毒学研究、疫苗生产和药物筛选等工作的准确性造成干扰。

第三，清除极为困难。该研究尝试用抗病毒化合物DB772处理受污染的细胞系，发现单纯药物处理虽然能暂时降低病毒载量，但连续传代后病毒会反弹并产生耐药突变。最终只有将有限稀释法与药物处理相结合，才在五个细胞系中的四个成功清除了BVDV。

鉴于BVDV污染的高隐蔽性和严重后果，对FBS原料和细胞系进行定期检测是唯一的预防策略。

目前BVDV的检测方法有病毒分离培养、抗原ELISA和RT-qPCR等。其中病毒分离培养最为传统，但需要数天至数周，且灵敏度有限。国际兽疫局（WOAH）在其诊断手册中明确指出，RT-qPCR检测具有灵敏度高、检测速度快等显著优势，尤其适用于急性、一过性感染中病毒载量较低的样本检测，是当前BVDV诊断中推荐的首选方法。

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采用实时荧光定量PCR技术，可快速、灵敏地检测牛源样本中的BVDV及其他常见牛源病原体。适用于FBS原料筛查、细胞系日常质控和生物制品安全性检测等多种场景，操作简便，数小时即可获得检测结果。

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参考文献：1. Nagayama K, Oguma K, Sentsui H. Survey on vertical infection of bovine viral diarrhea virus from fetal bovine sera in the field. J Vet Med Sci. 2015 Nov;77(11):1531-4. doi: 10.1292/jvms.14-0556. Epub 2015 Jun 12. PMID: 26074250; PMCID: PMC4667678.

2. Nishimori A, Iwasaki S, Andoh K, Matsuura Y. Improved method for elimination of bovine viral diarrhea virus from contaminated cell lines using virus inhibitor DB772. J Vet Med Sci. 2025 Oct 1;87(10):1149-1157. doi: 10.1292/jvms.25-0109. Epub 2025 Aug 1. PMID: 40754431; PMCID: PMC12508568.

3. Roth JS, Lee TD, Cheff DM, Gosztyla ML, Asawa RR, Danchik C, Michael S, Simeonov A, Klumpp-Thomas C, Wilson KM, Hall MD. Keeping It Clean: The Cell Culture Quality Control Experience at the National Center for Advancing Translational Sciences. SLAS Discov. 2020 Jun;25(5):491-497. doi: 10.1177/2472555220911451. Epub 2020 Apr 1. PMID: 32233736; PMCID: PMC8506661.

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