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大鼠细小病毒 KRV、H-1 qPCR 检测

已有 70 次阅读 2026-8-26 09:16 |个人分类:大小鼠病原体检测|系统分类:科研笔记

一、 KRV、H-1 病毒KRV（Kilham rat virus）、H-1（H-1 parvovirus）均为大鼠细小病毒，KRV：Kilham Rat Virus，基勒姆大鼠病毒；H-1：Toolan’s H-1 virus（H-1 PV），是实验大鼠常见的传播病毒，会干扰动物实验：免疫紊乱、肿瘤模型、生殖毒性、胚胎死亡，是 SPF 大鼠必检项目。二、KRV 和 H-1 检测方法体系

KRV 和 H-1 检测方法有以下几种：ELISA（酶联免疫吸附）

IFA（免疫荧光）

IEA（免疫酶染色）

HAI（血凝抑制试验）

实时荧光定量 qPCR

免疫法是通过检测抗体的方式检测KRV 和 H‑1 病毒抗体的存在，可以检测到实验动物病毒的既往感染历史。但是抗体的产生有个窗口期，需要病毒感染一定时间一定量之后才会产生抗体，所以抗体的检测时间相对滞后。实时荧光定量 qPCR是通过PCR的方法检测KRV 和 H-1 病毒核酸，病毒核酸增殖的时间比较早，所以检测时间比抗体的检测早一些。

PCR 核酸检测，感染早期直接检出病毒，缩短窗口期。常采用单重或者多重 qPCR 同时检测 KRV和H-1。KRV 和 H-1 序列相似度高，引物探针需验证特异性，避免交叉扩增。样本避免交叉污染，核酸提取全程防气溶胶。细小病毒DNA核酸稳定，易环境污染，样本处理、核酸提取、qPCR 配液严格分区，样本处理区核酸提取区→配液区→扩增区。

翼和大小鼠病原体质量控制多重qPCR检测试剂盒采用Taqman荧光定量PCR技术，多重检测，能一次检测多种病毒，满足检测多种微生物的需求，降低了实验成本，节省了实验的时间。使用的SPF.M/R-RV-001 能够匹配到包含KRV 和 H-1 病毒在内的八项国标大鼠小鼠的必检病毒。当然也可以搭配或者直接使用SPF.M/R-RVR-003检测试剂盒对大鼠的KRV 和 H-1 病毒进行鉴定。