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小鼠肝炎病毒(MHV)的qPCR检测方法

已有 371 次阅读 2026-5-1 23:01 |个人分类:大小鼠病原体检测|系统分类:科研笔记

小鼠肝炎病毒MHV

小鼠肝炎病毒(MHV)属于冠状病毒,呈圆形或者多形态表面带有囊膜与花瓣状纤突MHV病毒是股正RNA且为线性不分段。它的病毒粒子呈多形态或圆形,它的直径一般为80~160nm。MHV呈根据MHV特性的不同,可将MHV分为两类:呼吸毒株和肠毒株。感染MHV后小鼠会有肠炎和肝炎的临床表现。传染源头一般是带毒小鼠的粪便和垫料,MHV可通过胎盘垂直传播,这导致不带母源抗体的乳鼠感染易发病和死亡。

MHV传染性强,一般情况下,大部分带毒小鼠为隐性感染,无明显外观改变,但是在某些环境的刺激下会暴发疾病。在低温条件下仍可存活,当免疫抑制、应激或其他因素导致带毒小鼠免疫力下降时,潜伏感染可被激活,引发临床症状甚至死亡,并可能在群体内爆发流行

 

感染小鼠肝炎病毒临床特点

小鼠肝炎疾病是由小鼠肝炎病毒(MHV)感染引起的小鼠常见疾病,MHV的分布范围广MHV是啮齿类动物中难以消灭的病毒之一,因为其隐性感染和感染后的严重程度,实验小鼠的MHV感染应引起广大研究学者的高度重视,而对MHV的防治措施更应该是重中之重。会导致实验数据失真、实验失败,甚至影响研究结论的科学性与可信度。MHV感染会从多方面改变小鼠的生理状态,严重破坏实验小鼠种群的稳定性。这种“隐性感染潜伏、显性感染爆发”的特点,使得许多研究学者在不知情的情况下使用了感染小鼠,直接影响实验的后续开展。

 

小鼠肝炎病毒检测方法

常规样本的MHV检测方法,多采取血清学方法。国家标准《实验动物小鼠肝炎病毒检测方法》(GB/T14926.22-2001)中指出的检测方法有酶联免疫吸附实验(ELISA)、间接免疫荧光抗体实验(IFA)和免疫酶实验(IEA)。除此之外,GB/T 14926.22-2026中RT-PCR是用于检测MHV感染的一种推荐检测方法,该国标5.1日开始执行。

RT-PCR检测病毒时所需的样本量少、更是可以在疾病早期检测到病毒感染,特异性高,。此检测方法的研究将对实验动物中MHV的快速筛查,提高检测效率和阳性检出率奠定良好基础。缺点是仅代表采样时存在病毒核酸(可能是活动性感染,也可能是残留核酸);需要特定的实验室条件和防污染措施;成本通常高于血清学筛查。

翼和生物开发的大小鼠病原体检测试剂盒中将小鼠肝炎病毒做为重要的检测项目,例如在SPF级大小鼠病原体质量控制多重qPCR联检试剂盒(国标病毒必检八项)检测试剂盒中,小鼠肝炎病毒作为联检的筛查项目,可以对样本进行小鼠肝炎病毒的筛查,如果样本中含有小鼠肝炎病毒,则会跳出荧光信号。而在Ⅲ型呼肠孤病毒Reo-3、仙台病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV鉴别试剂盒中,可特定的鉴别样本中含有的病毒是否是小鼠肝炎病毒。

qPCR的检测方案特异性强,灵敏度高,操作简单,易于早期发现小鼠肝炎病毒的存在,做到早发现、早解决,更有利于实验动物质量的管控。因此,应用必将越来越广。



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