定义：“克隆”是什么？

克隆（Cloning）在生物学中是一个宽泛的方法类别，其共同本质是：产生遗传上完全一致的个体、细胞或DNA分子拷贝。

“克隆”一词源自希腊语κλών（klōn，意为“细枝”），原指植物无性繁殖。今天它在生物学中涵盖三个完全不同的技术层面，分别对应个体、细胞、分子——这是所有混淆的根源。

“克隆”的本质区别与操作边界

1. 细胞克隆（个体/细胞层级的克隆）

定义：通过细胞核移植（Somatic Cell Nuclear Transfer, SCNT），将一个细胞的核移入去核卵细胞中，使其发育成与核供体遗传一致的个体或胚胎。

核心操作：取出供体细胞核（胚胎细胞或体细胞）→移入去核卵母细胞→激活发育，移植代孕或体外培养。

产物：完整的生物个体（如多莉羊）或胚胎干细胞系。

技术特征：涉及完整的基因组转移、卵母细胞重编程、个体发育过程。

经典案例：1962年，戈登将非洲爪蟾体细胞核移植 → 成体蛙；1965/1980年，童第周将金鱼×鳑鲏、鲤×鲫异种核移植 → 成体鱼；1996年，威尔穆特将绵羊体细胞核移植 → 多莉羊。童第周1965-1980年的所有“核移植”工作均属此类。

2. 分子克隆（DNA/基因层级的克隆）

定义：将特定的DNA片段插入载体（如质粒、病毒），导入宿主细胞（通常为大肠杆菌）进行复制，获得大量遗传一致的DNA分子拷贝。

核心操作：用限制性内切酶切取目标DNA→与载体DNA连接→转化宿主细胞→筛选、扩增、提取。

产物：纯化的DNA片段、重组蛋白表达系统、基因工程载体。

技术特征：不涉及完整生物体，仅在分子层面复制DNA。这是分子生物学实验室的常规技术。

经典案例：1973年，科恩/博耶首例重组DNA实验；任何基因的PCR产物TA克隆；新冠mRNA疫苗的质粒构建。

注意：童第周从未从事此类工作。这是1970年代后才在西方兴起的分子生物学技术。

3. 转基因技术（基因修饰层级的操作）

定义：将外源DNA导入生物体的基因组，使其获得新的可遗传性状。可与克隆技术联用，但本质是基因修饰，而非“产生遗传一致拷贝”。

核心操作（多种路径）：原核显微注射（小鼠、鱼类）→病毒载体转导→CRISPR/Cas9基因编辑→体细胞核移植+基因编辑（克隆与转基因的联用）。

产物：携带外源基因的转基因生物（如荧光鱼、抗虫棉、人源化抗体小鼠）。

技术特征：核心目的是引入新基因或修改原有基因，而非复制基因组。可与克隆联用（如先编辑体细胞、再核移植），但二者是独立的技术范畴。

经典案例：1982年，帕尔米特/布林斯特的超级小鼠（大鼠生长激素基因）；朱作言的转基因鲤鱼“冠鲤”；其他如转基因抗虫棉花、转基因三文鱼。

童第周1973年的mRNA注射实验：这是最易混淆之处。童第周1973年与牛满江合作，将鲫鱼卵mRNA注入金鱼受精卵，获得尾鳍由双尾变单尾的变异鱼（“童鱼”）。这个实验不是细胞克隆（没有核移植），也不是现代意义上的转基因（没有DNA整合、没有稳定遗传品系）。它在技术谱系上属于外源核酸诱导的表型变异实验。

它在今天的学科分类中更接近“RNA注射”或“瞬时转染”，而非建立稳定转基因品系。童第周时代尚无“转基因”概念，他的实验是用当时的工具追问细胞质能否影响遗传表现——这是表观遗传学的先驱探索，不是转基因技术。

四者区分速查（最简可考版）

附表  细胞克隆、分子克隆、转基因技术、核算诱导的差异

为什么这个区分对理解童第周至关重要？

童第周的学术生涯恰好跨越了这些概念的诞生与分化过程。

1963年：他做的是细胞克隆——这是世界首例鱼类异种核移植，技术本质与戈登1962完全相同，区别在问题导向（戈登问“核是否全能”，童问“质如何影响核”）。

1973年：他做的是外源核酸诱导——这是用RNA注射追问细胞质功能。它不是细胞克隆（无核移植），也不是现代转基因（无DNA整合证据，未建立稳定品系）。它是被时代的技术条件所限、用朴素工具探索表观遗传机制的先驱实验。

1980年：他的遗作鲤鲫移核鱼——仍然是细胞克隆，只是物种组合不同（鲤核+鲫质），问题仍是“异种核质可配合性”。

童第周终其一生从未从事“分子克隆”，也从未从事现代意义上的“转基因”。他的两个主要学术贡献是：鱼类异种核移植技术体系的建立与核质关系问题的追问（细胞克隆）；外源mRNA诱导性状变异的表观遗传学先驱实验（非克隆、非转基因）。

用今天的术语倒推历史，最容易遮蔽历史本身。把1973年“童鱼”称为“转基因鱼”，就像把列文虎克称为“微生物学家”——概念没有错，但遗忘了他们是在定义概念之前探索未知的人。

小结：一句话可验证的事实

那么，克隆 = 个体/细胞层级的遗传拷贝（核移植）；分子克隆 = DNA层级的遗传拷贝（质粒扩增）；转基因 = 基因层级的修饰与引入（生殖系整合）。

童第周的工作：细胞克隆——1965金鱼×鳑鲏、1980鲤×鲫（世界领先）；分子克隆：从未涉及；转基因的先驱形式——1973 mRNA注射诱导表型变异——非稳定转基因，属表观遗传学先驱探索

戈登的工作：细胞克隆——1962非洲爪蟾体细胞核移植（世界首创，范式突破）；未涉及分子克隆与转基因。

区分三者，才能看懂童第周在做什么、为什么他与戈登走的是两条路、以及为什么他在国际发育生物学史中的位置长期未被正确归类。