RNAi介导的精氨酸激酶基因敲低导致淡色库蚊死亡率高，并对其繁殖和吸血行为产生负面影响

精氨酸激酶(Arginine kinase, AK)是无脊椎动物参与能量代谢的关键酶之一，被认为是RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术防治农业害虫的靶点。虽然大多数昆虫只有一个AK基因，但在淡色库蚊(淋巴丝虫病和流行性脑炎的主要媒介)中发现了两个AK基因。

采用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)方法获得CpAK1和CpAK2基因的全长cDNA序列。采用反转录定量PCR (RT-qPCR)检测CpAK1和CpAK2在不同发育阶段和组织中的表达水平。利用RNA干扰(RNAi)技术分析了CpAK1和CpAK2在繁殖和取血行为中的作用。从Cx中分离到CpAK1和CpAK2的全长cDNA（图 1）。

图 1. CpAK1和CpAK2基因的进化分析

表达谱分析显示，CpAK1的mRNA水平在所有发育阶段和检查的组织中均显著高于CpAK2，并且CpAK1和CpAK2的表达均在血喂养的反应中上调（图 2）。

图 2. 不同阶段的表达水平 

RNAi介导CpAK1和CpAK2基因共敲低导致雌蚊死亡率升高(74.3%)，孵化率降低(59.9%)（图 3）。

图 3. 注射后48h不同处理的存活率

以CpAK1和CpAK2为靶点的dsRNA共注射对雌蚊的采血率和充血率有显著的负面影响（图 4）。

图 4. 不同处理组雌蚊吸血率

CpAK1和CpAK2在所有发育阶段和组织中均有检测到，但表达水平存在差异。RNAi介导的AK基因敲低导致高死亡率，并对Cx的吸血行为产生负面影响。提示AK可作为未来基于RNAi的蚊虫防治靶点。

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