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直扩、裂解法、抽提法,三种样本前处理该如何取舍?

已有 132 次阅读 2026-10-21 13:05 |个人分类:支原体|系统分类:观点评述

翼和两款试剂盒提供三种样本制备路径:直扩、裂解法、核酸抽提法,很多用户分不清不同方案适用边界,选错方案造成灵敏度不足。

1️⃣ 直扩法(BPM50):直接取3‑5 μL细胞上清上qPCR。优点:最快,完全不用处理。局限:灵敏度约200 CFU/mL。适合:细胞日常高频初筛,快速排除重度污染;不适合放行、细胞库、原材料检测。

2️⃣ 裂解法(BPM50):1‑1.5 mL样本离心沉淀,裂解液95℃10 min裂解。灵敏度可达10 CFU/mL。适合:科研实验室样本,无复杂抑制物,追求简便。不适合高血清、蛋白含量极高的复杂生物制品。

3️⃣ 核酸抽提法(BPMPro100):2 mL样本离心富集,柱式或磁珠抽提DNA。灵敏度稳定10 CFU/mL,可耐受复杂基质。适合CGT放行、细胞库、血清、收获液、药典合规检测。

简单总结:科研快速粗筛选直扩;科研追求灵敏度选裂解;药企QC、申报放行必须用抽提富集方案。

翼和说明书附录给出了适配的手工抽提试剂盒与全自动磁珠设备型号,无需自己摸索条件。



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