Nutlin-3a（Rebemadlin，AbMole，M2894）是一种MDM2拮抗剂，能通过特异性阻断MDM2与肿瘤抑制因子p53之间的相互作用，解除MDM2对p53的泛素化降解，从而稳定p53蛋白水平并激活其下游转录程序。在野生型TP53细胞中（如结肠癌HCT116），10 μM Nutlin-3a处理24小时可显著抑制增殖、诱导G1期细胞周期阻滞及凋亡，同时下调β-连环蛋白、并抑制上皮-间质转化（EMT）进程，以及减少细胞迁移^[1]。

Nutlin-3a（ CAS No.：675576-98-4）还具有非p53依赖性的细胞活性，在结肠癌细胞（包括p53突变型Caco-2、SW480）中，Nutlin-3a通过内质网应激激活CHOP（一种细胞应激与凋亡相关的蛋白），上调死亡受体DR5，并通过Caspase-8通路诱导细胞凋亡^[2]；Nutlin-3a（Rebemadlin，AbMole，M2894）还在H1299细胞（一种p53缺失细胞）中，与干扰素α（IFN-α） 联用后通过抑制cyclin D1/CDK4阻断细胞周期^[3]。Nutlin-3a（10 μM）可以抑制骨肉瘤细胞增殖并促进细胞凋亡^[4]。

Nutlin-3a（5 μM）还能通过诱导AMP激酶活化，激活急性白血病细胞的自噬^[5]。在动物模型研究中，小鼠（包括SCID小鼠、裸鼠）异种移植实验表明，Nutlin-3a（Rebemadlin）可在细胞水平和动物实验（小鼠）中有效抑制NCI-H295R来源的肾上腺皮质癌、ECA-109来源的食管鳞癌、GBM10来源的胶质母细胞瘤（颅内模型）及黑色素瘤肿瘤的生长。此外，Nutlin-3a（25 mg/kg）还可以激活小鼠肺部p53基因的表达并逆转小鼠的肺动脉高压^[6]。

参考文献及鸣谢

[1] Hui, W.; Liu, S.; Zheng, J.; et al. Nutlin-3a as a novel anticancer agent for adrenocortical carcinoma with CTNNB1 mutation. Cancer medicine 2018, 7 (4), 1440-1449.

[2] Lu, M.; Ren, Y.; Feng, S.; et al. MDM2 inhibitor induces apoptosis in colon cancer cells through activation of the CHOP-DR5 pathway, independent of p53 phenotype. Frontiers in pharmacology 2025, 16, 1508421.

[3] Shuvalov, O.; Kizenko, A.; Shakirova, A.; et al. Nutlin sensitizes lung carcinoma cells to interferon-alpha treatment in MDM2-dependent but p53-independent manner. Biochemical and biophysical research communications 2018, 495 (1), 1233-1239.

[4] Wang, B.; Fang, L.; Zhao, H.; et al. MDM2 inhibitor Nutlin-3a suppresses proliferation and promotes apoptosis in osteosarcoma cells. Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2012, 44 (8), 685-691.

[5] Borthakur, G.; Duvvuri, S.; Ruvolo, V.; et al. MDM2 inhibitor, nutlin 3a, induces p53 dependent autophagy in acute leukemia by AMP kinase activation. 2015, 10 (10), e0139254.

[6] Mouraret, N.; Marcos, E.; Abid, S.; et al. Activation of lung p53 by Nutlin-3a prevents and reverses experimental pulmonary hypertension. 2013, 127 (16), 1664-1676.

细胞系：U-2 OS

方法：Cells were seeded in duplicate in 96-well plates (104 per well), incubated for 6 h, and treated with 10 μM Nutlin-3a for 24, 48, and 72 h, respectively, or exposed to 0–10 M Nutlin-3a for 48 h. Cell viability was determined using the Luminescent cell viability kit.

浓度：10 μM

处理时间：24, 48, and 72 h

参考文献：Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). 2012 Aug;44(8):685-91.

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

动物实验参考

动物模型：C57Bl/6j mice

配制：0.9% NaCl and 30% DMSO

剂量：6, 12, or 25 mg/Kg/d

给药处理：Intraperitoneal injection

参考文献：Circulation. 2013 Apr 23;127(16):1664-76.

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。建议制定动物给药及实验方案时，尽量参考已发表的相关实验文献（溶剂种类及配比众多，简单地溶解目的化合物，并不能解决动物给药依从性、体内生物利用度、组织分布等相关问题，未必能保证目的化合物在动物体内充分发挥生物学效用）。