多瘤病毒

多瘤病毒（Polyomavirus, POLY）为双链环状DNA病毒，在实验大鼠、小鼠种群中高发，导致实验动物肿瘤发生、免疫损伤、脏器病变、繁育异常的主要病原，同时易造成实验动物群内交叉感染，干扰动物实验数据准确性、影响动物实验重复性。

qPCR检测方法和详细实验操作流程

qPCR（实时荧光定量PCR）是目前大小鼠POLY病毒检测的一种越来越被接受和认可的方法，荧光信号随扩增产物指数实时增长，具备特异性强、灵敏度高、耗时短的特点。仪器全程监测荧光信号变化，通过Ct值判定样本阴性/阳性，因POLY为DNA病毒，检测无需逆转录步骤，直接进行DNA模板扩增即可。

实验操作流程

1. 样本预处理：样本充分研磨破碎。

2. DNA提取：严格按照核酸提取试剂盒说明书操作，提取样本总DNA。

3. PCR扩增：进行荧光定量qPCR检测。

4. qPCR反应体系配制（20μL体系，通用标准），加入样本，设置阴性和阳性对照。

5. qPCR扩增程序设置，启动检测。

6. 判断结果

注意事项：

1. qPCR实验灵敏度高，全程使用无酶无菌耗材，移液器定期校准，实验台面紫外消毒，严禁扩增产物带入配制区，防止假阳性；分区操作。

2. 试剂避光操作，避免荧光探针失活，避免频繁的反复冻融；定期校准荧光定量PCR仪，保证荧光采集、温度控制精确，确保实验数据可靠。

3. 样本管控：样本采集后及时处理，避免室温长时间放置导致核酸降解。

翼和大小鼠病原体质量控制多重qPCR检测试剂盒采用Taqman荧光定量PCR技术，多重检测，能一次检测多种病毒，使用联检试剂盒SPF.M/R-RV-001 能够匹配到包含多瘤病毒在内的八项国标大鼠小鼠的必检病毒。联检试剂盒满足检测多种微生物的需求，降低了实验成本，节省了实验时间。当然也可以搭配或者直接使用SPF.M/R-OVH-005 检测试剂盒对多瘤病毒进行鉴定。

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