在科研和工业检测中，时间就是效率。传统的端粒酶活性检测方法往往需要数天甚至数周才能出结果，而翼和生物的端粒酶催化亚基TERT基因表达检测试剂盒，仅需约4小时10分钟即可完成全部检测流程。

这么快的速度是如何实现的？让我们来拆解一下整个实验流程。

第一阶段：RNA抽提（约60分钟）实验从细胞样本开始，首先需要抽提总RNA。翼和生物推荐使用Trizol法或商业柱式法抽提试剂盒。对于熟练的实验人员来说，10个样本以内的RNA抽提大约需要60分钟。

抽提得到的RNA需要满足质量要求：浓度≥125ng/μl，OD260/280比值在1.8-2.0之间。这样才能保证后续反转录和qPCR的质量。

第二阶段：反转录（约60分钟）得到高质量RNA后，接下来是反转录反应，将RNA反转录成cDNA。翼和试剂盒配套了特异性逆转录引物，能够特异性地逆转录TERT基因的mRNA，提高检测的特异性。

反转录反应程序为：20℃ 10分钟→42℃ 1小时→72℃ 5分钟。整个过程约60分钟。

第三阶段：qPCR体系配制（约30分钟）反转录完成后，需要将cDNA进行4倍稀释，然后配制qPCR反应体系。翼和试剂盒采用预混液形式，只需将qPCR Mix、引物探针混合液、样本cDNA和水按比例混合即可，操作非常简便。

10个样本的体系配制大约需要30分钟。值得一提的是，试剂盒采用双色荧光检测，FAM通道检测TERT基因，Cy5通道检测内参基因GAPDH，单管即可完成两个基因的检测，大大节省了样本和试剂。

第四阶段：上机检测（约100分钟）体系配制完成后，就可以上荧光定量PCR仪进行检测了。扩增程序为：94℃预变性5分钟，然后95℃变性15秒、58℃退火45秒、72℃延伸1分钟，共40个循环。72℃延伸时收集荧光信号。

整个扩增过程约100分钟。扩增结束后，仪器会自动给出Ct值，根据Ct值就可以判断样本的端粒酶活性是阳性还是阴性。

总计：4小时10分钟四个阶段加起来，10个样本以内的检测仅需约4小时10分钟。如果是批量样本，还可以实现流水线操作，效率更高。

相比传统TRAP法需要数天、裸鼠成瘤试验需要16周，翼和生物的端粒酶检测试剂盒在效率上具有压倒性优势，是快速筛查的理想工具。

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