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染色体核型分析方法

已有 306 次阅读 2026-3-31 14:56 |系统分类:科普集锦

1. 制片

根据细胞沉淀的量,加入适量的固定液轻轻吹打均匀。取4预冷的干净载玻片,滴细胞悬液2-3滴于载玻片上染色体分散仪中静置干燥。一般一个病人滴片2-3张。标片按样本号进行标记,按顺序放在玻片板上。

2. 烤片老化

置于90烤箱中烘烤2小时后取出待显带。 

3. 显带3.1. 配制胰酶消化液配制后,置于染色缸中;同时准备一缸蒸馏水/生理盐水37水浴预热30 min左右。3.2. 配制吉姆萨染液3.3. 试片将老化后的玻片选取1张在37预热后的胰酶化、清水漂洗,放入染缸染色4-5min后大量清水冲洗,然后在显微镜下观察带纹,以掌握合适的消化时间。带纹的标准为能清晰的区分染色体上的深带和暗带,末端的浅带也有显示。3.4. 大量标本消化,集中染色,漂洗,晾干玻片粘贴标号后置玻片板待上机。3.5. 上机扫描和图像采集Auto Vision显微图像自动扫描和分析系统标准操作规程》进行染色体图片扫描。通常设定每片扫描100张图片。如遇嵌合或复杂核型,加扫一片。3.6. 染色体核型阅片、校片、报告审核及出具按《染色体核型阅片、校片、报告审核及出具标准操作规程》操作。

 

图片1111.png 

4. 染色体阅片4.1. 临床样本随机计数20个分裂相,染色体总数为46条时,挑选条带分辨率高的5个分裂相进行核型分析,核型命名标准参照ISCN2020

 

4.2. 如发现有3个细胞丢失同一条染色体则算一个细胞系,有2个细胞增加同一条染色体则算一个细胞系,同时具有二种以上细胞系的,样本应加大计数到100个。产前样本根据《胎儿染色体核型分析判读指南》相应扩大计数,并标出各细胞系所占比例。

 

4.3. 对性畸形及高度怀疑性染色体异常的病人应加大染色体的计数,即计数50个、100个分裂相。

 

4.4. 于药典要求的细胞,分常规分析20个、50个、100个、500个以及1000个(按知客户要求),统计多倍体、超二倍体、亚二倍体、染色体结构畸变等比例;对具有代表性的数目与结构异常,均要独立进行核型分析并报告。

 

4.5. 技术人员完成计数与分析后,填写《细胞遗传室分析记录表》,由细胞遗传实验室负责人进行校对,交细胞遗传室复核;遇有疑难问题,报告组织外相关人员会诊。

 

4.6. 所有玻片及阅片记录应存档和管理,多余的玻片可销毁,并严格执行国家有关隐私的规定。

 

图片2222.png 



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