荧光定量PCR概念

  荧光定量PCR（Real-Time Quantitative PCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时检测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

SYBR Green I 荧光染料原理

在PCR反应体系中加入过量的SYBR荧光染料，SYBR特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完成同步。

荧光定量方法

绝对定量：是用一系列已知浓度的标准品制作标准曲线，在相同的条件下目的基因测得的荧光信号量同标准曲线进行比较，从而得到目的基因的量

相对定量：是通过与内参基因Ct值之间的相差来计算表达基因的差异，也成之为2^-∆∆Ct

扩增曲线：随着PCR反应的进行，扩增产物不断累积，荧光信号强度不断增加，每经过一个循环，收集一次荧光信号，通过荧光信号强度的变化检测扩增产物量的变化，从而到扩增曲线图

荧光定量PCR应用

疾病研究、科学研究、药物研发、临床诊断

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