中国科学家首次建立PPARγ基因敲除猪模型

 针对动植物进行基因靶向操作的技术，是解析基因功能、研究疾病，以及农业经济生产中一个有用的工具。至今，基因靶向操作主要是通过在胚胎干细胞（embryonic stem cell, ES）中进行同源重组的方法进行。但同源重组方法由于需要ES细胞而常被限制在个别物种。一种基于锌指核酸内切酶（zinc-finger nuclease, ZFN）基因靶向修饰的新技术被应用于包括植物、果蝇、爪蟾、斑马鱼和大鼠等不同物种的基因操作。通过胚胎注射ZFN的质粒或是mRNA 可以有效地定靶并迅速地在内源基因上引起可遗传的突变。

中国科学院广州生物医药与健康研究院赖良学课题组与密西根大学医学中心陈育庆教授合作采用锌指核酸内切酶技术和细胞核转移技术实现了猪的PPARγ特异位点的敲除。课题组首次成功构造了内源性基因敲除猪。此项研究的方法提高了在猪原代细胞中基因打靶的效率，使其效率从10^-6提高到超过4%。由于猪是研究人类心血管疾病的一种较为理想的动物模型，PPARγ敲除的模型猪可以为探讨以PPARγ为靶点的噻唑烷二酮类抗糖尿病药物的心血管作用提供一种十分有用的工具。（Yang D, et al. Cell Res, 2011校蕾供稿）

脂联素参与PPARγ对糖尿病小鼠血管内皮功能的改善

塞唑烷二酮（TZDs）类药物作为PPARγ的激动剂，不仅具有胰岛素增敏作用，而且有着重要的血管内皮保护功能。香港中文大学黄聿教授课题组研究发现，脂肪组织分泌的脂肪因子之一脂联素（adiponectin），是PPARγ改善糖尿病小鼠血管内皮功能过程中一个重要的参与者。

实验发现，体外培养的db/db肥胖小鼠脂肪组织在给与罗格列酮刺激后，脂联素的分泌增加，用其培养液对分离的db/db小鼠主动脉进行培养，内皮依赖性舒张（EDR）得到提高，以皮下脂肪的作用最为显著。而直接给与主动脉以罗格列酮处理、同时使用脂联素抗体或PPARγ拮抗剂GW9662刺激脂肪组织、用罗格列酮刺激脂联素敲除或PPARγ杂合小鼠的脂肪组织的情况下，db/db小鼠主动脉EDR没有明显改善。在体实验也支持了这一结果。口服罗格列酮4周后，db/db小鼠的主动脉EDR提高，且其皮下脂肪移植至对非药物处理组也使后者的主动脉EDR也得到改善。而脂联素基因的敲除使罗格列酮的内皮保护作用消失。这些体内外研究说明，脂肪组织分泌的脂联素介导了PPARγ激活对肥胖小鼠血管内皮功能的改善。该研究表明AMPK/eNOS通路和cAMP/PKA通路的激活，进而使NO的生物活性提高并降低ROS的产生是脂联素改善血管内皮功能的重要机制之一。

该研究结果提示我们在开发和使用新的PPARγ激动剂治疗糖尿病及并发的血管病变时，脂肪组织可能成为新的治疗靶标。（Wong WT et al. Cell Metab, 2011.殷睿映 供稿）

TRPV1激活增加PGC-1α表达 增加运动耐力和能量代谢

辣椒素受体-1(TRPV1)是一个非选择性的阳离子通道，表达于感觉神经元、脂肪组织、骨骼肌等。辣椒素（Capsaicin）是TRPV1的一个选择性激活剂。TRPV1结合配体后被激活，导致以钙离子为主的跨膜离子流动，使细胞内Ca²⁺ 浓度改变，进而参与痛觉整合、心血管系统调节、抗炎症反应、听力调节、胃肠功能等多种病理生理过程。TRPV1激活可以抑制脂肪生成，增加内皮依赖性的血管舒张，增加耗氧量，增加脂肪酸利用和运动耐力。

第三军医大学祝之明教授课题组研究表明，TRPV1激活增加PGC-1α表达，增加运动耐力和能量代谢。在体内和体外实验中，辣椒素可以增加PGC-1α的蛋白水平，促进线粒体生成，增加线粒体呼吸功能，这一过程依赖于TRPV1介导的Ca²⁺内流。与对照组相比，在食物中摄入辣椒素的野生型小鼠运动耐力更强，血浆中乳酸和甘油三酯的含量更少。而TRPV1敲除小鼠摄入辣椒素没有作用。在TRPV1转基因小鼠中，PGC-1α表达增加，氧化型肌纤维增多，运动耐力增强。本研究揭示了TRPV1在骨骼肌和能量代谢中的新功能，提示饮食中适当加入辣椒素对增强骨骼肌功能和预防代谢性疾病有积极意义。（Luo Z, et al. Cell Res,2011. 方立 供稿）

血管紧张素II受体拮抗剂激活PPAR-δ/AMPK对抗2型糖尿病

代谢综合征（metabolic syndrome, MS）以中心性肥胖为核心，合并血压、血糖、高甘油三酯和/或低HDL （高密度脂蛋白）血症，MS显著增加 2 型糖尿病和心血管疾病的风险。血管紧张素II（AngII）受体阻断剂（ARBs）常用于合并有糖尿病或糖尿病肾病的高血压患者的临床治疗。ARBs 潜在的抗糖尿病作用主要与它们能阻断肾素-血管紧张素系统（RAS），纠正AngII对代谢的副作用有关。而AngII通过对胰岛素信号通路、组织血流、氧化应急、交感神经活性和脂肪生成的作用损害葡萄糖代谢。AngII受体阻断剂替米沙坦是PPAR的部分激活剂。第三军医大学祝之明教授课题组研究发现替米沙坦通过在肌肉组织中激活PPARδ而改善胰岛素抵抗。研究发现，替米沙坦在肌小管中可以上调PPARδ以及AMPK的表达，并且当PPARδ基因敲除后，替米沙坦则不影响AMPK的表达及其磷酸化激活。在小鼠中，替米沙坦通过激活 PPARδ/AMPK 途径，抑制小鼠体重增加，增加腓肠肌中Ⅰ型纤维含量和运动氧耗量，提高运动耐量，增加胰岛素敏感性。然而，替米沙坦的在PPARδ敲除的小鼠中并没有这些作用。因此，PPARδ作为肌肉组织葡萄糖稳态的调控因子，可能成为防治 2型糖尿病的新型药物靶点。(Feng X et al. J Cell Mol Med 校蕾 供稿)

RXR激动剂Bigelovin结合RXR的结构基础

维甲酸X受体（RXR）属于核受体超家族成员，是一种配体依赖的转录因子，在调控稳态和细胞发育过程中具有重要的功能。RXR的激动剂已被证明具有治疗代谢性疾病和癌症的潜能，例如Rexinoids是一种合成的RXR 高度特异性配体，可以阻断饮食中胆固醇的吸收。

中国科学院上海药物研究所沈旭课题组确认了天然产物Bigelovin为RXR的一种选择性激动剂。然而有趣的是，这个化合物不能激活RXRα:RXRα同源二聚体转录活性，但能激活RXRα:PPARγ异源二聚体转录活性，并能抑制RXRα:LXRα异源二聚体转录活性，对RXRα:FXR异源二聚体的转录活性没有作用。在共激活子SRC-1肽段存在下Bigelovin结合并激活RXRα的晶体结构显示，Bigelovin采用了一种独特的结合模式，Bigelovin在结构中缺少酸性基团，暗示酸性基团在RXR激活过程中几乎没有作用。这项研究为基于结构的药物设计提供了一种先导化合物Bigelovin。(Zhang H et al. J Mol Biol,2011 校蕾 供稿)

DAX1作为FXR的共抑制子抑制其转录活性

法尼酯衍生物X受体(FXR)是一种胆汁酸受体，属于核受体超家族成员。FXR通过调控一系列基因的表达，在胆汁酸、脂质和糖代谢中发挥重要作用。DAX1是编码核内激素受体超家族的一个成员，因其缺少核受体结构中经典的DNA结合域而属于核受体超家族中的非典型成员，多作为众多核受体的共抑制子发挥其生理作用。上海交通大学医学院李小英教授课题组发现：DAX1与FXR共同定位在细胞核内，且作为FXR的共抑制子阻遏FXR的转录活性。当DAX1过表达时，FXR及其下游靶基因表达均下调，相反，当DAX1沉默时，FXR及其下游靶基因表达则上调。并且，DAX1 结构域中的N-末端的三个LXXLL序列对于FXR转录活性的发挥是必须的。此外，课题组还研究发现DAX-1抑制FXR的转录活性通过与其共激活子SRC-1和PGC-1α 竞争而发挥作用。(Li J, et al. Biochem Biophys Res Com, 2011校蕾 供稿) 

PPARγ作用于中枢神经系统参与食物摄入和胰岛素敏感性的调节

 PPARγ可促进脂肪分化和脂肪生成，调节体内能量代谢，增强机体对胰岛素的敏感性，其选择性激动剂上用于治疗2型糖尿病。近期《Nature Medicine》上发表的两篇研究论文表明，PPARγ作用于中枢神经系统，并参与调控食物摄入和肝脏胰岛素敏感性等。Lu等利用synapsin I Cre-LoxP系统构建了中枢神经特异性PPARγ敲除小鼠（PPARγ-BKO小鼠）。研究发现：高脂饮食下，相比于正常小鼠，PPARγ-BKO小鼠的食物摄取量及体重均明显下降，并且自主运动和耗氧量显著增加。他们进一步发现PPARγ-BKO小鼠的瘦素抵抗得到改善。然而在罗格列酮治疗高脂饮食诱导的胰岛素抵抗的实验中，他们发现罗格列酮在PPARγ-BKO小鼠中改善胰岛素敏感性的作用被削弱。这些发现提示中枢PPARγ不仅调控饮食摄入而且参与TZD类药物的改善胰岛素抵抗的作用。无独有偶，Ryan及其同事利用慢病毒构建在第三脑室过表达持续激活PPARγ模型，发现持续激活的中枢PPARγ显著增加小鼠的食物摄取，体重增加。而在高脂饮食的小鼠脑中利用shRNA或PPARγ拮抗剂抑制内源性PPARγ的作用可减少食物摄入及体重增加。这两个研究组的发现共同揭示了中枢PPARγ的作用，这些研究结果为临床上使用TZD提供借鉴，并且为研究饮食所致的肥胖提供病理生理学基础。（Lu M, et al. Nature Med, 2011. Ryan KK, et al. Nature Med, 2011 方希、校蕾供稿）

吡格列酮使糖耐量减低患者转化为2型糖尿病的风险降低

刊登在《N Engl J Med》上的一项临床试验研究显示：服用吡格列酮（Pioglitazone）可以大幅降低糖耐量减低（IGT）患者转化为2型糖尿病（T2DM）患者的风险，改善部分心血管危险因素，虽然可能伴随着体重增加和水肿。

该研究设计为前瞻性的、随机、双盲、安慰剂对照、多中心的临床试验。研究由八个医学中心共同参与，募集602名符合标准的IGT患者参加试验，以发生2型糖尿病为观测终点。

根据研究中心与性别的不同对志愿者进行随机区组设计，确定了吡格列酮组303人，安慰剂对照组299人。然后志愿者们接受有关糖尿病的饮食指导，并在空腹过夜后于次日清晨接受口服糖耐量测试，测定血糖、胰岛素和C肽水平等作为基线资料。此后，志愿者们按照研究设计开始服用药物，剂量为第一个月每天30mg，一个月后改为每天45mg。志愿者的随访总长度两年。每次随访，病人返回医学中心进行各种观测指标的测量。在研究结束时再次测量所有基线资料。以发生2型糖尿病作为观测的主要结局。但为了保证试验的科学性，研究设计者不揭盲，参与者需继续按照研究设计完成试验进程至最终截止日期。

对试验结果的统计分析表明：服用吡格列酮可降低IGT患者转化为2型糖尿病的风险，降幅72%（P<0.001），并且糖耐量转化到正常水平的比例从28%增至48%。使用吡格列酮改善了一些心血管疾病的危险因素，如降低收缩压（P=0.03），提高高密度脂蛋白（P=0.008）以及降低颈动脉内膜中层厚度（P=0.047）等。这些效果对于长期糖尿病并发症的影响还有待于进一步研究。

该研究由武田药品有限公司（Takeda Pharmaceutical）赞助，同时获得田纳西大学医学院临床研究中心、南加州大学凯克医学院临床研究中心的资助。（DeFronzo RA, et al. N Engl J Med, 2011. 王珊 供稿）

ROR的配体可以抑制 Th17细胞的分化和自身免疫的发生

Th17细胞是一类可以特异性地产生IL-l7的细胞，是初始CD4⁺ 细胞分化中的一种细胞亚群，Th17细胞的发现更多的是与自身免疫性疾病的研究相关。Th17细胞产生的特异性效应因子IL-l7在自身免疫性疾病和感染性疾病中发挥重要的作用。随之，人们也发现当效应T细胞出现调节紊乱时易导致自身免疫性疾病及过敏性疾病的产生。

前期研究已经证实，维甲酸相关孤核受体(ROR) α和γt在Th17细胞的分化中发挥中重要的作用。Laura A. Solt等在2011年4月发表于Nature上的成果发现：RORα和RORγt的特异性配体SR1001能够通过抑制IL-l7A 基因的表达和蛋白产物的产生来抑制小鼠Th17细胞的分化。此外，当加入已经分化的小鼠或者人源Th17细胞，SR1001还可抑制细胞因子的表达，从而抑制小鼠的自身免疫疾病的发生。因此，研究成果提示，可以将RORα和RORγt 作为靶标来特异性的抑制Th17细胞的分化和功能的发挥，并且这种化合物有望作为治疗自身免疫性疾病的新的药物。(Solt LA, et al. Nature, 2011. 校蕾 供稿)

ATGL通过PPARα和 PGC-1调节心脏线粒体功能

脂肪组织甘油三酯水解酶(adipose triglyceride lipase , ATGL) 是一种催化甘油三酯水解第一步反应的重要脂肪酶，在机体能量代谢调节中发挥重要作用。由ATGL介导的甘油三酯的水解产物是细胞内PPAR配体的重要来源。Haemmerle 等的研究表明，ATGL敲除小鼠心脏中 PPARα与PPARδ的下游靶基因和辅因子PGC-1α与PGC-1β表达减少，线粒体氧化和呼吸功能受损，心肌细胞的脂质的异常堆积，ATGL敲除小鼠因心力衰竭而提早死亡。研究发现，食物中添加0.1%（wt/wt）PPARα 激动剂Wy14643可以恢复ATGL敲除小鼠心脏PPAR下游靶基因的正常表达，改善线粒体呼吸功能，恢复心脏功能，防止小鼠因心力衰竭而死亡。出乎意料的是，PPAR-δ 激动剂GW501516（5μg/g体重）并没有减少ATGL敲除小鼠心脏甘油三酯含量和改善心肌代谢缺陷。这篇文章表明ATGL介导的脂质水解对心脏中PPARα–PGC-1复合物发挥功能起着必要的作用。 （Haemmerle G et al. Nature Medicine，2011. 校蕾 供稿）

ADIOL-ERβ-CtBP通路抑制小胶质细胞介导的炎症反应

炎症在神经退行性疾病的发生中扮演着重要的角色。星形胶质细胞和小胶质细胞作为中枢神经系统免疫防御的第一道防线，在炎症反应中起重要作用。加州大学圣地亚哥分校Kaoru Saijo等发现了一条新的途径，即ADIOL-ERβ-CtBP途径对小胶质细胞介导的炎症反应具有负调控作用。内源产生的类固醇化合物ADIOL（5-androsten-3β,17β-diol）作为雌激素受体ERβ的选择性配体发挥作用。研究证实，ADIOL 可以招募辅阻遏物CtBP（C-terminal binding protein）结合在AP-1依赖的启动子区，抑制炎症相关基因的表达，并且抑制Th17 细胞的活化。给予ADIOL 或者采用ERβ的特异性配体激活ERβ，均能促进CtBP的募集和结合，阻止ERβ依赖的炎症反应。相反地，ADIOL减少或者ERβ的表达下调则会加剧Toll-like receptor (TLR)4激动剂诱导的炎症反应。此研究为ADIOL/ERβ/CtBP通路参与调节小胶质细胞的炎症反应提供了证据。(Saijo K, et al. Cell, 2011. 校蕾 供稿)

卵磷脂DLPC激活孤儿核受体LRH-1发挥抗糖尿病的作用

LRH-1（liver receptor homolog-1）是核受体的Ftz-F1亚家族成员，表达于肝、肠、胰腺外分泌部和卵巢，其内源性配体尚不明确。LRH-1在胚胎发育、胆固醇代谢、胆汁酸的动态平衡和类固醇激素生成等方面起重要作用。Jae Man Lee等的研究发现一种特别的卵磷脂DLPC（dilauroyl phosphatidylcholine）是LRH-1的配体。DLPC可以结合并激活LRH-1，增加其下游靶基因的表达。DLPC可以提高小鼠肝脏中胆汁酸合成酶的表达，促进胆汁酸的合成。DLPC还可以降低肝脏甘油三酯和血清中葡萄糖的水平。在胰岛素抵抗小鼠模型中，DLPC可以减少脂肪肝并促进葡萄糖的稳态。而在Lrh-1缺陷的小鼠中，DLPC的抗糖尿病和抗脂肪肝的作用均消失。这些结果提示，依赖LRH-1的卵磷脂信号通路可以调节胆汁酸的代谢和葡萄糖的平衡，为糖尿病的治疗提供了新的线索。(Lee JM, et al.  Nature, 2011 校蕾 供稿)

SMRT保护饮食引起的肥胖和胰岛素抵抗

美国加利福尼亚Salk生物研究所Evans RM研究组发现核受体共抑制子SMRT（silencing mediator of retinoid and thyroid hormone receptors）在脂肪组织中促进氧化磷酸化，保护机体免受食物诱导的肥胖和胰岛素抵抗。

SMRT通过受体相互作用结构域（receptor interaction domains，RIDs）与核受体结合发挥作用。研究者通过高表达RID1结构域突变型SMRT基因（SMRT^mRID1）从而阻断SMRT与核受体相互作用来研究SMRT在代谢中的作用。研究发现SMRT^mRID1基因敲入小鼠在正常饮食下表型正常，但在高脂喂养之后会出现多种代谢失调的症状。高脂喂养下的SMRT^mRID1基因敲入小鼠表现出明显的肥胖，在肝脏、白色和棕色脂肪中出现脂质的聚积。组织学上的主要表现是附睾和内脏脂肪细胞的肥大。在内脏脂肪出现了炎症因子的表达升高。SMRT^mRID1基因敲入小鼠的胰岛素敏感性降低，同时对TZD和AICAR降糖作用的敏感性也降低，血清胆固醇、甘油三酯、瘦素的水平上升，脂联素水平下降。肝脏异常脂质堆积引起肝细胞损伤。棕色脂肪中的脂质堆积伴随着产热量的下降和线粒体生成减少。基因表达分析表明PPARδ，ERRγ，PGC-1α及其与产热、线粒体生成、脂肪酸氧化等相关的大量靶基因的表达显著的降低SMRT^mRID1小鼠高脂喂养情况下还出现呼吸商下降，行走活动降低等现象。

SMRT^mRID1基因敲入小鼠模型可以在研究2型糖尿病、肥胖等代谢综合征中核受体异常调控细胞应答中发挥重要作用。同时这个研究揭示了在高脂饮食的应激下核受体共抑制子SMRT在能量代谢中的必要作用。（Sungsoon Fang, et al. PNAS, 2011.王志鹏 供稿）

针对CDK5磷酸化PPARγ为靶点设计新型抗糖尿病药物

肥胖会引起CDK5对核受体PPARγ磷酸化修饰，进而降低PPARγ对特定的靶基因的调控，降低胰岛素敏感性，而PPARγ的整体转录活性却不受影响。传统抗糖尿病药物罗格列酮等可以抑制CDK5对PPARγ的磷酸化作用，且药物的胰岛素增敏作用和抑制磷酸化作用正相关。科学家基于这样的机制设计的新一类药物，有望使治疗效果和副作用效果分离。

美国哈佛大学和佛罗里达Scripps研究所科学家设计了新型PPARγ配体SR1664。与传统的PPARγ配体不同，该化合物可以和PPARγ结合但不能激活PPARγ的转录活性，而是通过抑制CDK5介导的PPARγ Ser273磷酸化发挥抗糖尿病作用；同时SR1664也不影响CDK5对经典底物如Rb蛋白的磷酸化。体内外药效学研究显示，PPARγ激动剂罗格列酮相似，SR1664可以显著改善胰岛素敏感性，降低血糖。但不具有罗格列酮水钠储留、体重增加、骨密度降低等副作用。该研究提示，以PPARγ的磷酸化作为新的药物靶点来设计副作用较小新型的抗糖尿病药物是可行的。（Choi JH, et al. Nature, 2011.方希 供稿）

Fifth Scientific Meeting of the Asian Society for Vascular Biology

Oct 26-29, 2012

Xi’an, China

Meeting Summary

The Fifth Scientific Meeting of the Asian Society for Vascular Biology will be held on 26 to 29 October, 2012 in historical Xi'an, the capital of the Shanxi province in China. The Scientific Committee will plan an exciting program of latest advance in vascular biology and medicine research. There will be also Young Investigator Awards and Chaired Poster Presentation Competition.

Xi'an, formerly known as Chang'an is one of the oldest cities and one of the four great ancient capitals of China, with over 3000 years of rich history. Xi'an is the home to famous Terracotta Army and Great Wild Goose Pagoda. An optional social program will be planned on 29 October 2012 to tour Xi'an city.

Servier Young Investigator Awards

Six prizes under the sponsorship of the Institut de Recherches Internationales Servier will be awarded for the best oral and poster presentation by young researchers at age under 35 years old. All prizes will be presented at the Closing Ceremony on 28 October 2012.

Call for abstract

Abstract submission deadline: May 31th, 2012

Authors are requested to fill out the Abstract Submission Form in MS Word format and send the abstract to the Meeting Secretariat by email (asvb2012@yahoo.com, asvb2012@hotmail.com).

For detailed information, visit

http://www.asvb-cn.org/

Nuclear Receptor Matrix: Reloaded 

Apr 15 - 20, 2012 

Fairmont Chateau Whistler, Whistler, British Columbia

Organizers: Ronald M. Evans and David J. Mangelsdorf

Meeting Summary

Nuclear receptors (NRs) govern expression of genes involved in a broad range of reproductive, developmental, metabolic and immune response programs. For this reason, NRs have been investigated for over 20 years as promising targets for drugs to treat a multitude of therapeutic indices. However, despite the success of numerous NR-based therapies, there remain significant hurdles exploiting NRs to develop newer classes of therapies that achieve targeted benefits with reduced side effects. 

Thus, understanding the mechanisms, transcriptional targets and networks of physiologic pathways that govern NR action has become an important new strategy for evaluating the role of NRs in health and disease. This “reloaded” effort is now beginning to produce exciting new avenues of research in the field. This meeting will bring together a key group of junior and senior investigators that are exploring these new directions and provide participants with a matrix of unique possibilities for them to investigate in both academic and pharmaceutical laboratory settings.

Registration and Pricing 

You may register for this meeting until April 15, 2012.

Non-Student Fees

The Registration Fee is $795.00 on and before February 15, 2012.

After February 15, 2012, the Registration Fee is $945.00

Student Fees

The Student Registration Fee is $570.00 on and before February 15, 2012.

After February 15, 2012, the Registration Fee is $720.00

For detailed information, visit

http://www.keystonesymposia.org/Meetings/ViewMeetings.cfm?MeetingID=1180

International Symposium on Lipid and Tissue Injury (ISLT)

Apr 06-08, 2012

Chongqing, China

Organizer: Centre for Lipid Research and Chongqing Medical University.

Meeting Summary

Sponsored by the National Natural Science Foundation of China and Chonqing Medical University, the International Symposium on Lipid and Tissue Injury (ISLT) 2012 will be held at Chongqing, China, Apr 06-08, 2012. The meeting is organized by the Centre for Lipid Research and Chongqing Medical University.

The meeting provides unique opportunities to meet with colleagues from around the world with wide-ranging research interests and expertise within the research communities of lipid metabolism and Tissue Injury. In addition to invited Plenary Lectures and Mini-Symposia, there will be oral presentations of selected abstracts and poster presentations.

Young Investigator Competition

The Young Investigator Competition will be held to recognize outstanding endeavors by young investigators or fundamental and applied research in lipid metabolism and tissue injury.

The five to eight winners will each receive a plaque and a 500 RMB travel stipend.

Call for abstract

Abstract submission deadline: February 28th, 2012

All abstracts and papers must be submitted by email, please indicate: "The first author's name + title". Abstracts may be saved as Microsoft Word files

Email address：ISLT2012@yahoo.com.cn

Registration and Pricing 

Before March 30th, 2012:    800RMB

After March 30th, 2012:      1000RMB

Half discount for all postgraduate students. (Student certificate is needed)

For detailed information, visit

http://islt.cqmu.edu.cn

责任编辑：方立 校蕾