摘要：BAPTA-AM（AbMole，M4973，CAS No.：126150-97-8）是经典钙螯合剂 BAPTA（M4944，85233-19-8）的细胞膜通透性酯化衍生物，可进入细胞并在胞内酯酶作用下释放 BAPTA，快速缓冲胞质钙离子浓度。BAPTA-AM（AbMole，M4973）对钙离子具有高选择性（相对镁离子约十万倍），广泛用于胞内钙信号阻断、钙依赖性细胞过程解析与钙超载损伤模型研究。

一、BAPTA-AM的分子作用机制

BAPTA-AM（AbMole，M4973）由 BAPTA 的四个羧酸基团经乙酰氧甲酯修饰而成，疏水性酯化形式可跨膜进入细胞。进入细胞后，胞内酯酶水解酯键，释放出游离 BAPTA，BAPTA（AbMole，M4973）以 1:1 高亲和力结合钙离子，迅速降低胞质游离钙浓度。有文献证实，BAPTA对钙离子的选择性较镁离子高约十万倍，可在生理 pH 下特异性缓冲钙信号而不干扰镁依赖性酶活。与钙离子载体等激动工具互补，BAPTA-AM 提供的是可逆的钙阻断手段：洗去化合物并待其代谢后，胞内钙稳态可逐步恢复。

二、BAPTA-AM在细胞层面研究中的应用

在细胞层面，BAPTA-AM（AbMole，M4973）的常用浓度为 1~50 μM。BAPTA-AM 已在人 T 淋巴细胞 Jurkat 细胞的凋亡研究中广泛应用，10~20 μM 预处理可抑制内质网钙释放引起的线粒体膜电位崩解，使细胞对毒胡萝卜素（Thapsigargin，67526-95-8）或地塞米松（Dexamethasone，50-02-2）诱导的凋亡敏感性明显下降。BAPTA-AM 还在大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12 细胞的损伤模型中有所应用，涉及阻断钙超载、减轻氧化应激与保护神经元样表型的相关研究。在宫颈癌 HeLa 细胞中，有文献报道 BAPTA-AM 可抑制钙依赖性磷脂酶与蛋白酶活化。BAPTA-AM 也常与钙指示剂Fluo-4 AM（273221-67-3） 联用，作为钙成像实验中的对照处理以验证信号特异性。

三、BAPTA-AM在动物实验研究中的应用

在动物层面，BAPTA-AM（AbMole，M4973）的应用以动物来源的原代细胞为主。BAPTA-AM 已在小鼠原代胰岛β细胞的胰岛素分泌研究中用于区分钙依赖与非钙依赖的胞吐成分，缓冲胞内钙后葡萄糖刺激的胰岛素分泌显著下降。BAPTA-AM 还在大鼠原代皮层神经元的兴奋毒性模型中有所应用，涉及减轻谷氨酸（56-86-0）诱导的钙内流与神经元死亡的相关研究。在大鼠心肌缺血再灌注模型中，有文献报道局部给予 BAPTA-AM 可减轻钙超载导致的心肌损伤。

范例详解

Regenerative Biomaterials. 2026, rbaf124

AbMole 的 BAPTA‑AM（AbMole，M4973，CAS No.：126150-97-8）作为细胞渗透性钙离子螯合剂，在 BV2 小胶质细胞、小鼠原代小胶质细胞体外实验中用于钙信号阻断；清除胞内钙离子，用来验证 Piezo1 通道介导的钙内流在高硬度基质诱导小胶质细胞迁移中的必要性。BAPTA‑AM 处理后，高硬度基质所引发的胞内钙升高被消除，同时 AKT 信号激活、cofilin 去磷酸化、F‑肌动蛋白重组装以及小胶质细胞迁移能力均被显著抑制，证实 Ca²⁺是 Piezo1 下游介导基质刚度感知、调控细胞骨架重塑与细胞迁移的关键中间信号分子。

四、BAPTA-AM相关细胞实验（文献参考举例）

该方案适配胞内钙缓冲与钙依赖性凋亡抑制检测。

细胞系：T 淋巴细胞 Jurkat 细胞或大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12 细胞

检测指标与方法：BAPTA-AM（1、5、10、20、50 μM）预处理 30 min，加毒胡萝卜素（1 μM，Thapsigargin，67526-95-8）或地塞米松（Dexamethasone，50-02-2）诱导凋亡；Fluo-4 验证胞内钙降低；JC-1 检测线粒体膜电位；Annexin V 流式定量凋亡；Western blot 检测 cytochrome c 释放与 cleaved caspase-3。

浓度：1~50 μM

处理时长：预处理 30 min；诱导后检测 6~24 h

参考文献：Tsien R Y. A non-disruptive technique for loading calcium buffers and indicators into cells. Nature, 1981, 290(5806): 527-528.

*注：上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献调整。

五、BAPTA-AM相关动物实验（文献参考）

该方案适用于动物来源原代神经元的钙超载保护研究。

动物模型：SD 大鼠原代皮层神经元谷氨酸兴奋毒性模型

给药配制：BAPTA-AM 以 DMSO 配制母液，工作液现配现用

给药剂量：10~20 μM 工作浓度

给药方案：原代神经元培养第 7~10 天，BAPTA-AM 预处理 30 min 后加谷氨酸（100 μM）（56-86-0）损伤，检测细胞活力、胞内钙水平与凋亡率，并与未处理组比较。

参考文献：Tsien R Y. New calcium indicators and buffers with high selectivity against magnesium and protons: design, synthesis, and properties of prototype structures. Biochemistry, 1980, 19(11): 2396-2404.

*注：上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献调整。

总结

综上，BAPTA-AM（AbMole，M4973，CAS No.：126150-97-8）作为一种细胞膜通透性钙螯合剂，可用于钙信号阻断、钙超载损伤保护与钙依赖性细胞过程的细胞与动物实验。其高钙选择性与可逆作用特性，为钙信号研究提供了常用干预手段。

*本文所述均为科研试剂，仅供科学研究参考*

参考文献

[1] Tsien R Y. A non-disruptive technique for loading calcium buffers and indicators into cells. Nature, 1981, 290(5806): 527-528.

[2] Tsien R Y. New calcium indicators and buffers with high selectivity against magnesium and protons: design, synthesis, and properties of prototype structures. Biochemistry, 1980, 19(11): 2396-2404.

[3] Grynkiewicz G, Poenie M, Tsien R Y. A new generation of Ca2+ indicators with greatly improved fluorescence properties. Journal of Biological Chemistry, 1985, 260(6): 3440-3450.

[4] Lam M, Dubyak G, Chen L, Nunez G, Miesfeld R L, Distelhorst C W. Evidence that BCL-2 represses apoptosis by regulating endoplasmic reticulum-associated Ca2+ fluxes. Proceedings of the National Academy of Sciences USA, 1994, 91(14): 6569-6573.

[5] Pethig R, Kuhn M, Payne R, Adler E, Chen T H, Jaffe L F. On the dissociation constants of BAPTA-type calcium buffers. Cell Calcium, 1989, 10(6): 491-498.

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