摘要：Edaravone（依达拉奉，MCI-186 ，AbMole，M2251，CAS No.：89-25-8）是一种小分子自由基清除剂，具有清除羟自由基与过氧亚硝基、抑制脂质过氧化的活性。Edaravone 分子量小、可透过血脑屏障，在脑缺血再灌注、神经炎症与多种氧化应激损伤模型中应用广泛。Edaravone作用机制明确，是抗氧化干预研究中的常用工具化合物。本文介绍其分子作用机制、细胞与动物模型的研究应用及相关实验参考方案。

一、Edaravone的分子作用机制

Edaravone（依达拉奉，AbMole，M2251，CAS No.：89-25-8）的化学结构为3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮，其酮式结构可提供氢原子，快速淬灭羟自由基与过氧亚硝基，阻断自由基介导的脂质过氧化链式反应。在小鼠缺血再灌注过程中，活性氧暴发导致细胞膜脂质过氧化、血脑屏障破坏与神经元死亡，Edaravone 通过清除自由基打断这一级联，并抑制炎症因子表达与白细胞浸润，发挥神经保护作用。有文献证实，Edaravone（MCI-186）还可抑制黄嘌呤氧化酶与髓过氧化物酶相关的氧化损伤，并对铁死亡相关的脂质过氧化过程产生抑制作用。动物实验中，Edaravone 静脉或腹腔给药后迅速分布于大鼠和小鼠的各器官，能透过血脑屏障，该药代特征使其在中枢相关模型中具有使用便利性。

二、Edaravone在细胞层面研究中的应用

在细胞层面，Edaravone （MCI-186，AbMole，M2251，CAS No.：89-25-8）的常用浓度为 10~100 μM。Edaravone 已在大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12 细胞的氧糖剥夺再灌注模型中用于神经保护研究，10~50 μM 处理可提升细胞存活率约 30%，降低 ROS 水平与丙二醛含量，并抑制 cleaved caspase-3 上调。Edaravone 还在人脐静脉内皮细胞 HUVEC 的氧化损伤模型中有所应用，涉及减轻 H2O2 诱导的屏障功能破坏与细胞凋亡的相关研究。在小鼠巨噬细胞 RAW264.7 中，有文献报道 Edaravone 可抑制 LPS（Lipopolysaccharides，脂多糖）诱导的 NO 生成与炎症因子表达，涉及调节核因子κB信号通路的相关研究。此外，Edaravone 在小胶质细胞 BV2 的活化模型中也常用于评估抗炎与抗氧化效应。

三、Edaravone在动物实验研究中的应用

在动物层面，Edaravone（依达拉奉，MCI-186 ，AbMole，M2251）已在多种脑缺血与器官缺血再灌注模型中完成体内研究。在大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型中，按 3~10 mg/kg 静脉或腹腔给药，脑梗死体积较模型组缩小 30%~50%，神经功能评分改善，脑组织丙二醛水平下降。Edaravone 还在小鼠心肌缺血再灌注模型中有所应用，涉及缩小心肌梗死面积与抑制炎症浸润的相关研究。在顺铂或庆大霉素（Gentamicin，CAS No.：1403-66-3）诱导的肾毒性模型中，Edaravone 给药可减轻氧化损伤并改善肾功能指标。在SOD1 G93A 转基因肌萎缩侧索硬化模型小鼠发生病症的早期给予 Edaravone 可延缓运动功能下降。Edaravone 在实验动物中的耐受性较好，上述剂量下未见动物出现明显代谢负担。Edaravone 还在小鼠急性肺损伤模型中有所应用，涉及减轻氧化应激与肺组织炎症浸润的相关研究。在顺铂诱导的耳毒性模型中，Edaravone 给药可保护毛细胞并改善听功能指标，涉及清除耳蜗局部活性氧的相关研究。

四、Edaravone相关细胞实验（文献参考举例）

该方案适配自由基清除验证与氧化应激损伤保护检测。

细胞系：大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12 细胞

检测指标与方法：Edaravone（10、25、50、100 μM）预处理 2 h，氧糖剥夺 4~6 h 后复氧 24 h；CCK-8 检测细胞活力；DCFH-DA检测 ROS；硫代巴比妥酸法检测丙二醛；Western blot 检测 cleaved caspase-3、Bcl-2/Bax；可选铁死亡指标 GPX4、4-羟基壬烯醛。

给药浓度：10~100 μM

处理时长：预处理 2 h；复氧后检测 24 h

参考文献：Yoshida H, et al. Neuroprotective effects of edaravone: a novel free radical scavenger in cerebrovascular injury. CNS Drug Reviews, 2006, 12(1): 9-20.

*注：上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献调整。

五、Edaravone相关动物实验（文献参考举例）

该方案适用于脑缺血再灌注损伤的体内保护评价。

动物模型：SD 大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型

给药配制：Edaravone 以生理盐水配制，静脉或腹腔注射

给药剂量：3、10 mg/kg，再灌注即刻及每日给药，连续 3~7 天

给药方案：栓塞 90 min 后拔栓再灌注，给药组于再灌注即刻给药；24 h 后行神经功能评分，TTC 染色测定脑梗死体积，取缺血半暗带组织检测丙二醛、超氧化物歧化酶与炎症因子。

参考文献：Chan P H. Reactive oxygen radicals in signaling and damage in the ischemic brain. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism, 2001, 21(1): 2-14.

*注：上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献调整。*

总结

综上，Edaravone（MCI-186 ，AbMole，M2251）作为一种小分子自由基清除剂，可用于脑缺血再灌注、神经炎症与多种氧化应激损伤模型的细胞与动物实验。其分子量小、可透过血脑屏障、给药方便，适合急性损伤模型的干预研究。

*本文所述均为科研试剂，仅供科学研究参考

参考文献

[1] Yoshida H, Yanai H, Namiki Y, et al. Neuroprotective effects of edaravone: a novel free radical scavenger in cerebrovascular injury. CNS Drug Reviews, 2006, 12(1): 9-20.

[2] Chan P H. Reactive oxygen radicals in signaling and damage in the ischemic brain. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism, 2001, 21(1): 2-14.

[3] Lipton S A. Pathologically activated therapeutics for neuroprotection. Nature Reviews Neuroscience, 2007, 8(10): 803-808.

[4] Kikuchi K, Tancharoen S, Takeshige N, et al. Beyond neurological disease: new targets for edaravone. Expert Opinion on Therapeutic Targets, 2011, 15(4): 469-480.

[5] Kotake Y. Molecular pharmacology of edaravone, a free radical scavenger. Biological & Pharmaceutical Bulletin, 2008, 31(11): 1973-1977.

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