新辅助治疗抗PD-1疗法可能会增加肿瘤组织中的肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）的数量。通常肿瘤组织中有更多的TILs存在，往往有更好的疗效。新辅助抗PD-1治疗后肿瘤的主要病理反应（MPR）通常包括肿瘤坏死和纤维化。那么PD-1治疗后肿瘤坏死组织中的TILs（nTIL）有什么特点呢？ 

最近的一项研究，对41例有肿瘤组织坏死的黑色素瘤标本进行了T细胞标志（CD3和CD8）的免疫组化（IHC）染色。在这 41 例黑色素瘤中，14 例未做免疫治疗，27例接受了一剂新辅助抗PD-1治疗。肿瘤坏死组织中CD3+ 和 CD8+ nTIL存在的数量，是以缺失/极少或中度/活跃为标准区分为不同的类型，以便对坏死组织中nTIL的存在进行量化。研究终点是MPR和5年无复发生存率（RFS）。

 免疫组化检测结果显示，在未作免疫治疗组的患者中，3/14（21%）份标本中有中度/活跃的CD3+ nTIL，2/14（14%）份标本中具中度/活跃CD8+ nTIL。而在PD-1治疗组的标本中，存在中度/活跃CD3+ nTIL 的比率为59% （16/27），存在的中度/活跃CD8+ nTIL的比率为56% （15/27），均高于未接受治疗组。

抗PD-1疗法后，瘤组织的肿瘤坏死明显增加（P = 0.007）。在接受治疗的队列中，中度/活跃CD3+ 和 CD8+ nTIL数量与主要病理反应（MPR）有明显相关性（分别为 P = 0.042；P = 0.019）。有中度/活跃 CD3+ nTIL 存在的患者，其5年无复发生存率高于肿瘤组织中无/极少nTIL的患者（69% 对 0%；P = 0.006），这种现象在多变量分析中依然存在。而单独主要病理反应检测则表现为边缘性显著性。患者接受新辅助抗 PD-1 治疗后的坏死肿瘤组织中存在的CD3+和CD8+ nTIL数量与病理反应和5年RFS相关，也说明PD-1治疗后能增强肿瘤组织中TILs 的浸润和抗肿瘤免疫反应，TILs可能是PD-1治疗的主要效应细胞之一。 

利用体外分离培养扩增的TILs进行的过继性细胞治疗（Adoptive cellular therapy TIL-ACT）也可以消除或缩小转移性黑色素瘤。TIL-ACT疗法是一种很有前景的免疫疗法，可作为免疫检查点PD- 1阻断疗法的某种替代治疗，尤其适用于某些晚期黑色素瘤患者。尽管TIL-ACT疗法可以有效治疗转移性黑色素瘤，但其长期疗效仍仅局限于一小部分患者。因此，了解TIL-ACT治疗后，在肿瘤组织中的生物学特点。有助于优化和提高TIL-ACT的疗效。 

在另一项究中，利用单细胞转录组学和空间蛋白质组学技术，检测了一组接受了TIL-ACT一期临床试验治疗的转移性黑色素瘤患者的肿瘤标本。在对13例接受TIL-ACT治疗患者肿瘤样本的分析中，在治疗前基线时，那些对TIL-ACT有疗效反应的患者肿瘤组织中有更多活化的T细胞、巨噬细胞和树突状细胞存在，在肿瘤组织中形成强烈的刺激性相互作用。 

与无疗效反应的患者相比较，对TIL-ACT有疗效反应的患者中，表现有更高的肿瘤细胞内在免疫原性和突变负荷；表现有更强的CD8+ TIL细胞毒性；耗竭表型；和共刺激作用（costimulation，髓系细胞的I型干扰素信号增强）。经空间邻域分析（spatial neighborhood analyses）技术对细胞-细胞间相互作用的预测分析显示，在有治疗反应的患者中，存在丰富的基线（治疗前）瘤组织内和肿瘤基质中的反应性T细胞网络，其中包括激活的髓系细胞群体向CXCL9+巨噬细胞方向发展和T-髓系细胞网络进一步扩大的倾向。这些发现都表明，瘤内的免疫细胞之间存在强的基线支持网络，与肿瘤对TIL-ACT的疗效反应密切相关。有可能利用这些免疫细胞网络标记物来改善对适合TIL-ACT治疗患者的选择，指导TIL-ACT临床试验治疗的设计。 

肿瘤组织中存在增多的TILs, 这样的患者对PD-1和TIL-ACT疗法很可能有好的疗效反应。这与“Hot tumor”的理论很相似。T细胞-髓系细胞网络的现象，表明肿瘤组织中不同类型细胞的协同作用,可能会产生的更全面和强大的抗肿瘤效应,这对抑制肿瘤的进展是至关重要的。目前，只是对这方面的了解不多，随着对肿瘤免疫细胞互动网络，肿瘤微环境和TILs抗肿瘤作用认识的深入，希望能使肿瘤免疫治疗的效果越来越好。

1.        Tumor-Infiltrating Lymphocytes in Necrotic Tumors after Melanoma Neoadjuvant Anti–PD-1 Therapy Correlate with Pathologic Response and Recurrence-Free Survival.  Clin Cancer Res (Nov, 2024) 30 (21): 4987–4994.

2.        Response to tumor-infiltrating lymphocyte adoptive therapy is associated with preexisting CD8+ T-myeloid cell networks in melanoma. Sci Immunol 2024, 2;9(92)