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线性范围宽达4-256倍:翼和试剂盒的定量能力解析

已有 306 次阅读 2026-9-11 13:20 |个人分类:支原体|系统分类:科普集锦

在科研实验中,我们不仅需要知道样本是"阳性"还是"阴性",很多时候还需要精确知道目标基因的表达量是多少。这就要求检测试剂盒具有良好的线性范围和定量能力。上海翼和生物的端粒酶催化亚基TERT基因表达检测试剂盒,线性范围宽达4倍至256倍稀释,定量能力究竟有多强?

什么是线性范围?线性范围是指检测结果与样本浓度之间呈良好线性关系的浓度范围。在线性范围内,我们可以通过标准曲线精确计算样本的浓度。线性范围越宽,说明试剂盒能检测的浓度范围越大,适用性越强。

对于端粒酶检测来说,不同样本的TERT基因表达量可能差异很大——肿瘤细胞中表达量很高,而某些低表达细胞中表达量很低。如果线性范围不够宽,就可能出现高浓度样本超出线性范围、低浓度样本检测不到的情况。

翼和生物的线性验证方案为了验证试剂盒的线性范围,翼和生物设计了严谨的实验:将人阳性标准品细胞株(293T)的cDNA2倍梯度稀释,共设置12个稀释梯度(1-2048倍),每个浓度做3个重复。

验证结果:4-256倍稀释呈良好线性实验结果显示,TERT基因和内参基因GAPDH4倍至256倍稀释范围内,检测结果呈良好的线性关系:

• TERT基因:标准曲线相关系数R²=0.9973,扩增效率101.75%

• GAPDH内参:标准曲线相关系数R²=0.9972,扩增效率93.69%

这两个指标都完全符合可接受标准(R²≥98%,扩增效率90%-110%)。

宽线性范围的意义4倍到256倍的线性范围意味着什么?这意味着:

1. 高表达样本无需多次稀释:对于端粒酶活性很高的肿瘤细胞或胚胎干细胞,4倍稀释后就能在线性范围内准确定量,不需要反复摸索稀释倍数。

2. 低表达样本也能检测256倍稀释后仍能准确定量,说明试剂盒的灵敏度很高,对于低表达的样本也能可靠检测。

3. 定量结果准确可靠:在线性范围内,浓度和Ct值呈严格的线性关系,通过标准曲线计算的浓度值准确可靠。

翼和生物的技术优势能达到如此宽的线性范围,得益于翼和生物的技术创新:

• 两套检测系统信号增强:针对TERT基因设计两对定量引物和探针,混合后进行多重定量,显著提高了灵敏度,使低浓度样本也能被检测到。

• TaqMan探针法:探针法的背景荧光低,动态范围宽,能在很宽的浓度范围内保持良好的线性。

• 优化的反应体系:经过反复优化的反应体系和扩增程序,保证了在宽浓度范围内的高效扩增。

无论是高表达的肿瘤细胞,还是低表达的特殊样本,翼和生物端粒酶检测试剂盒都能给出准确的定量结果,为你的科研提供可靠的数据支持。



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