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SPF 大鼠小鼠的病毒和细菌真菌的qPCR检测方法

已有 878 次阅读 2026-5-31 21:32 |个人分类:大小鼠病原体检测|系统分类:科研笔记

实验大鼠和小鼠是重要的实验动物,在生命科学、医学、药学等领域应用广泛。特点是体型小巧、饲养便捷、繁殖周期短、遗传背景清晰、生理机制与人类高度相似,是连接基础研究与临床应用的关键实验动物,是现代生物医学研究中占有重要地位。

国标GB14922-2022中指出大小鼠的病原微生物必检项目包含病毒、细菌真菌和寄生虫类。其中国标病毒必检项目包含:Ⅲ型呼肠孤病毒Reo-3、仙台病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV、汉坦病毒HANT、小鼠肺炎病毒PVM、小鼠细小病毒MVM、大鼠细小病毒KRV、大鼠细小病毒H-1病原菌必检项目:支原体Ms、泰泽病原体Cp、铜绿假单胞菌Pa、鼠棒状杆菌Ck、嗜肺巴氏杆菌Pp、支气管鲍特杆菌Bb、沙门氏菌属Ss、肺炎克雷伯菌Kp大鼠小鼠检测的项目有所差异。对于免疫缺陷鼠来说,需要额外检测牛棒状杆菌Cb和小鼠诺如病毒MNV。

传统的检测方法如病毒等的免疫检测方案(ELISA、IFA、IEA)以及细菌检测的培养法等,这些检测方案很成熟,但是耗时长,灵敏度低2026年新的推荐性国标中将PCR 检测技术引入到检测方案中,包括普通 PCR 和荧光定量 qPCR 。

检测流程方便快捷只需要进行简单的核酸提取PCR 扩增即可进行结果判读(普通PCR需要电泳)

翼和生物采用多重荧光定量 qPCR 检测方案,成功开发出多款针对 SPF大鼠、小鼠的病毒和病原菌检测试剂盒,覆盖了 GB14922—2022中规定的 SPF 大鼠、小鼠需检测的病毒与病原菌项目。采用多重 荧光的qPCR 的检测方案,可以在一个反应孔中同时检测多种病毒或者细菌。

联检试剂盒中,6-8种病毒或者病原菌放在一个孔中进行检测。鉴定试剂盒中2-3种病毒或者病原菌放在一个孔中进行检测。一个荧光通道可检测多种病毒或者细菌。联检和鉴定试剂盒搭配使用,节省检测时间和检测成本qPCR检测方法灵敏度高、特异性强、已经成为很多实验室的检测方案

 



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