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牛源病原体的多重荧光定量PCR检测方法

已有 255 次阅读 2025-11-11 00:09 |个人分类:牛源病原体|系统分类:科研笔记

牛血清中富含血浆蛋白、多肽、生长因子、激素及无机物等广泛应用于疫苗生产细胞培养和生物医药等领域应用于医学诊断中检测病原体的抗体水平可作为组织培养、细胞培养和诊断试剂等重要的原辅材料新生牛血清是从新生14小时内的小牛血液中提取的血清,经过无菌采集、分离和过滤等工艺制成常用于疫苗以及单克隆抗体的制备但是这种生物来源的制品,容易含有生物本体来源的病毒,特别是一些病毒类生物活性物质污染会严重影响制品的质量安全。

 

由于新生牛血清中病毒来源广、种类多,因此针对新生牛血清的病毒检测是非常必要病毒检测的目的是力求从源头上控制牛血清中的病毒保证新生牛血清原材料质量保证实验和生产的顺利进行。

 

有报道指出,由于使用了污染牛腹泻病毒(BVDV)的胎牛血清,导致胎牛肾细胞、牛肾细胞等多种细胞系的污染牛腹泻病毒是疫苗生产中常见的污染物及严重的外源性致病原之一,因此实际生产过程中牛血清中BVDV的检测尤为重要。牛血清检测牛细小病毒(BPV)、 狂犬病病毒(RV)、Ⅲ型呼肠孤病毒(Reo-3)、生牛血清检测Ⅲ型牛副流感病毒 (PI3)、牛腹泻病毒(BVDV)Ⅲ型牛腺病毒(BAV-3)等都是牛血清中重要的病原外源因子

 

根据《中国药典三部》(2010版)要求:新生牛血清在生产使用前需严格检测至少6种牛源性病毒,包括牛细小病毒(BPV)、狂病病毒(RV)、型呼肠孤病毒(Reo-3)、型牛副流感病毒(PI3)、牛腹泻病毒(BVDV)和型牛腺病毒(BAV-3)。检测方法包括细胞培养法、免疫荧光抗体检查法,以及针对无法用感染试验检测的病毒采用的核酸检测法。未经病毒灭活处理的牛血清若有任何一项检测呈阳性,则不得用于生产。翼和生物建立外源性病毒的快速检测方法通过荧光定量的方式检测牛源性病毒,将有助于把控牛血清质量,防止外源性病毒的污染。翼和生物推出的牛源病原体多重荧光PCR检测试剂盒,具有精准、灵敏、稳定、高效等特点,能够同时检测多种病原体,广泛应用于牛血清进口检测、生物制药生产以及细胞培养研究等领域,检测灵敏度可达10 copies/μL。

 



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